CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭和转移影响的实验研究

发布时间：2020-03-30 15:55

【摘要】： 侵袭和转移是影响黑色素瘤患者生存的首要因素,也是其治疗的最大障碍。SDF-1/CXCR4生物轴作为少数具有点对点精确传导生物信息的生物轴系统之一,在多数肿瘤的侵袭和转移中发挥重要作用。越来越多的研究表明,趋化因子受体CXCR4(Chemokine receptor CXCR4)参与肿瘤侵袭和转移的多个关键环节。本研究利用RNA干扰技术下调趋化因子受体CXCR4基因的表达,探讨CXCR4基因沉默对黑色素瘤及细胞系体外侵袭及转移的影响及机制。设计合成CXCR4特异性短发夹状RNA(shRNA)插入pSilencer载体,转染人高转移性黑色素瘤细胞株MV3,RT-PCR和Western blot检测shRNA对靶基因CXCR4表达的影响。利用Transwell小室模型检测细胞体外侵袭能力,MTT检测细胞增殖状况。通过裸鼠尾静脉瘤细胞注射方法,构建黑色素瘤转移模型,检测CXCR4基因沉默对黑色素瘤转移能力的影响。研究证实,在人转移性黑色素瘤细胞系、人黑色素瘤原发灶及转移组织内均存在CXCR4选择性高表达;实验成功构建并筛选出CXCR4特异性shRNA质粒载体,结果表明,以CXCR4为靶向的shRNA能够有效下调CXCR4基因的表达,降低黑色素瘤细胞增殖、体外侵袭及转移能力。提示CXCR4是黑色素瘤侵袭和转移过程中的重要调控因子,为黑色素瘤的生物治疗提供了新的靶分子并奠定实验基础。
【图文】：

图 1.2 CXCR4 mRNA 在黑色素瘤 MV3、B16F10 细胞系中的表达Fig 1.2 Expression of CXCR4 mRNA in melanomaMV3 and B16F10 cell linesM: DNA marker3 黑色素瘤 MV3、 B16F10 细胞系 CXCR4 免疫荧光观察结果应 用 细 胞 免 疫 荧 光 检 测 技 术 ，， 对 MV3 和 B16F10 细 胞 进 行CXCR4-FITC 细胞免疫荧光染色，均见 CXCR4 阳性荧光染色。GAPDHCXCR4500bp→200bp→

皮肤恶性黑色素瘤Figure1.4Cutaneousmalignantmelanoma
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R739.5

【引证文献】

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1 盛文;CXCR4基因沉默对宫颈癌细胞体外侵袭转移能力的影响[D];中南大学;2012年

本文编号：2607745