SIRTs在银屑病中的异常表达

发布时间：2020-04-09 19:10

【摘要】：【目的】研究SIRTs在银屑病中的表达水平是否有变化,为银屑病的临床治疗及预后评估奠定理论基础。【方法】1.动物模型:用咪喹莫特乳膏(明欣利迪)或生理盐水涂抹BABL/c小鼠背部7天,第8天处死小鼠取小鼠背部皮肤。2.细胞实验:TNF-α诱导HaCaT细胞。3.临床病例收集:根据患者年龄、性别、标本采集部位收集临床严重银屑病(PASI10)标本和良性对照标本。另外,搜集银屑病及皮肤良性病变蜡块。4.利用实时荧光定量PCR技术、免疫蛋白印迹技术检测SIRTs mRNA及其蛋白水平的差异性表达。5.利用免疫荧光技术检测SIRTs蛋白的差异性表达及SIRTs在细胞中的主要定位。6.统计学分析。【结果】1.小鼠银屑病模型表明,BABL/c小鼠背部有明显的红斑、鳞屑和炎症.2.TNF-α诱导HaCaT细胞结果表明:细胞形态、细胞间隙发生表观学改变。3.实时荧光定量PCR技术、免疫蛋白印迹技术和免疫荧光技术结果表明SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4和SIRT5 mRNA和蛋白表达水平降低,而SIRT6和SIRT7呈上升趋势。4.免疫荧光技术显示SIRT1、SIRT2既存在于细胞质也存在于细胞核,SIRT3、SIRT4和SIRT5主要存在于细胞质,SIRT6和SIRT7主要在细胞核;此外,SIRTs在表皮的表达量高于真皮组织。【结论】SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4和SIRT5在银屑病皮损及TNF-α诱导的HaCaT细胞中较正常对照组表达量降低,而SIRT6和SIRT7表达水平则呈上升。
【图文】：

图 1 TNF-α 在银屑病发病机制中的作用。病原相关分子模式（PAMP）或病毒与表皮的TLR 和 NLR 结合后通过 MyD88 途径和非 MyD88 途径激活 MAP 激酶和 NF-КB 信号转导通路，然后刺激表皮细胞产生 TNF-α 等细胞因子，产生的细胞因子特别是 TNF-α 反作用于上皮，刺激上皮表达 MHC-Ⅱ、ICAM-Ⅰ、EGFR、K17、IAP 等，，此时由于上皮细胞表达了 MHC-Ⅱ

图 2 细胞增值与毒性实验（CCK8 实验）。经 TNF-α 诱导后多的时间点是 24 小时。Fig.2. Cell proliferation and toxicity experiment (CCK8 expof the large number of HaCaT cells that were induced by TNF- al
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R758.63

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本文编号：2621151