影像学技术和分子生物学技术在某些皮肤病诊断中的应用

发布时间：2020-04-10 05:35

【摘要】：研究背景:传统的皮肤病诊断方式依靠患者的病史、体格检查(主要是皮肤科检查)以及组织病理学结果。尽管许多皮肤病以组织病理学检查结果为诊断的金标准,但存在以下问题:一方面病理取材会造成创伤,不宜作为皮肤病的筛查技术而广泛应用;另一方面,病理诊断有时难以确定病因,因此有必要探讨新的皮肤病诊断技术。影像学技术已广泛应用于临床诊断,但在皮肤科的应用价值尚待探讨,近年来,高频超声技术已逐渐应用于某些皮肤病的诊断,但在我国尚未被广泛推广。微滴数字PCR技术是近年来新出现的分子生物学技术,是一种基于油包水乳化微滴技术的核酸定量分析技术且无需标准曲线,既往报道该技术在感染性疾病病原微生物检测中有明显的优势,但在我国尚缺乏广泛的临床实践。本文拟探讨高频超声技术和微滴数字PCR技术在某些皮肤病诊断中的应用价值,为该两项技术在皮肤科的广泛应用积累基础。研究目的:1.探索影像学技术—高频超声对大疱性皮肤病的筛查诊断的价值。2.建立并评估微滴数字PCR技术在麻风尤其是少菌型麻风诊断中的应用价值,加深对分子生物学技术推动皮肤科进步的理解。研究方法:1.以大疱性类天疱疮和寻常型天疱疮分别作为表皮下水疱和表皮内水疱的代表疾病,使用22MHz和50MHz探头对病人进行超声检查,同时结合病理学结果进行比较分析。2.首先利用多菌型麻风患者和对照组建立用于麻风诊断的数字微滴PCR技术;然后应用于少菌型病人的检测,并与TaqmanqPCR结果进行比较研究结果:1.大疱性类天疱疮为代表的表皮下水疱的超声图像是表皮下有一类圆形的低回声暗区,此为水疱位置所在,该低回声暗区下缘延伸至真皮浅层,而以寻常型天疱疮为代表的表皮内水疱皮肤高频超声图像表现为水疱位置可见低回声暗区,底部为一条细长的高回声明亮条带,同表皮的回声强度类似,但BP患者超声检查图像中多无此亮带,可将此高回声明亮条带作为区分水疱所在位置的证据。2.使用我们建立的数字微滴PCR技术,33例少菌型麻风患者皮肤组织临床检测样本结果中,qPCR阳性的样本是15例(45%),数字微滴PCR阳性样本是28例(85%),这些样本中qPCR和数字微滴PCR均是阳性的样本是15例,数字微滴PCR阳性而qPCR阴性的为13例,无qPCR检测阳性而数字微滴PCR检测阴性者。研究结论:1.高频超声能够帮助临床上水疱位置的区分,可以作为大疱性皮肤病的筛查诊断手段,尤其是当尼氏征不明显时。此外,高频超声图像和病理图像有着高度的一致性。2.在麻风诊断中,数字微滴PCR技术优于Taqman qPCR技术,为临床上麻风早期诊断尤其是PB型患者的早期诊断提供了新的手段。3.关于新技术在皮肤科的应用仍需要进一步的探索,一方面,深入挖掘现有影像学技术或分子生物学技术的特点及原理,可以进一步拓展应用领域,让现有的技术为临床带来更多的便利;另一方面,新技术层出不穷,要大胆尝试其在皮肤科的应用。
【图文】：

声图,皮肤,临床表现,患者

１０逦女逦８３逦１个月逦表皮内逦基底膜逦１４２．０３逦１４１．６２逡逑图１－１展示了一例老年男性ＢＰ患者典型的临床、皮肤超声和病理结果图像，逡逑通过２２邋ＭＨｚ和５０邋ＭＨｚ探头下超声图像，可以清晰看出类圆形的低回声暗区，逡逑下缘延伸。逡逑图１－１邋一例典型ＢＰ患者临床表现（Ａ）、２２邋ＭＨｚ皮肤超声表现（Ｂ），邋５０邋ＭＨｚ皮肤超逡逑１９逡逑

声图,皮肤,免疫荧光,临床表现

表１－２中显示了邋ＰＶ患者的特征，ＰＶ患者的平均年龄为４３．５０年土邋１１．５６逡逑（２８岁？５８岁），病程长短不一，根据临床检查，常规病理水疱位置，ＤＩＦ免疫逡逑沉积部位和ＥＬＩＳＡ结果，明确诊断为ＰＶ。图１－２是一例４３岁女性ＰＶ患者临床、逡逑皮肤超声和病理结果图像，２２邋ＭＨｚ和５０邋ＭＨｚ探头下超声图像均清晰地展示出逡逑边界清晰的低回声暗区，下缘可见一条细长的高回声明亮条带，同表皮的回声强逡逑度类似。图１－３展示了一例５８岁女性ＰＶ患者，２２ＭＨｚ下边缘模糊不清，但是逡逑通过５０ＭＨｚ下图像可以看到清晰的边缘。逡逑表１－２寻常型天疱疮患者特征逡逑．逦常规病￣＇逦ＥＬＩＳＡ结果逡逑编性年逦ＤＩＦ免疫沉逦逡逑病程逦皮肤超声结果逦理水疱逡逑号别龄逦积部位邋ＤＳＧ１邋ＤＳＧ３逡逑位置逡逑女２８３Ｗ逦表皮下表皮细胞间￣１３９．６１逦０．３９逡逑，，逦Ａ邋？邋可见突出表皮的低回逦、逡逑２逦女５８逦１个月逦表皮下逦表皮细胞间逦３６．５１逦１２６．３１逡逑声暗区，水疱与真皮交逡逑３逦男３４逦１年逦表皮下逦表皮细胞间逦１１４．３５逦１８８．５８逡逑界处可见一条细长的逡逑４邋女５９逦３年逦＿逦＿逦表皮下逦表皮细胞间逦０逦１０８．６１逡逑闻回声明亮条带
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R751

【参考文献】