更昔洛韦与阿昔洛韦体外抗水痘—带状疱疹病毒活性的研究

发布时间：2020-04-24 19:15

【摘要】：病毒性疾病发病率高,流行范围广,对人类的健康构成很大威胁,特别是艾滋病及其病原病毒的发现、SAPS病毒的流行等,使病毒性疾病日益引起人们的重视。水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)归类于疱疹病毒科,人是其唯一的宿主,是引起人类水痘和带状疱疹两种疾病的病原。在免疫力低下的患者中,特别是HIV感染者,水痘和带状疱疹可出现严重的并发症;特别是带状疱疹具有特征性的神经痛,年老体弱者疼痛剧烈,甚至难以忍受,某些带状疱疹患者甚至在皮疹消退后,仍遗留神经痛,此种神经痛可持续数月甚至数年之久。因此及时有效地控制VZV感染无论是对于减少并发症还是减少后遗神经痛都是非常必要的。近年来新型抗病毒药物的出现和发展为VZV感染的治疗提供了更多的选择,如阿昔洛韦、更昔洛韦等。 目的:本实验通过VZV Vero细胞培养的方法分离VZV野生菌株,并运用细胞病变法评价抗病毒药物更昔洛韦和阿昔洛韦的Vero细胞毒性和体外抗VZV野生菌株和标准菌株活性。 方法:①采用Vero细胞培养的方法分离鉴定VZV野生菌株;②将分离鉴定的野生菌株VZV4和标准菌株VZV-Ellen确定感染滴度,计算半数组织培养感染量(median tissue culture infective dose,TCID50);③检测Vero细胞、Hela细胞、McCoy细胞对VZV的敏感性;④确定更昔洛韦和阿昔洛韦Vero细胞毒性,分别计算更昔洛韦和阿昔洛韦的半数中毒浓度(median toxic concentration,TC50)和最大无毒浓度(maximal nontoxic concentration,TC0);⑤进行更昔洛韦和阿昔洛韦体外抗VZV活性实验,分别计算更昔洛韦和阿昔洛韦抗野生菌株VZV4和标准菌株VZV-Ellen的半数有效浓度(50% effective concentration,EC50)和治疗指数(therapeutic index,TI)。 结果:①通过对VZV引起细胞病变的直接观察、Giemsa染色、HE染色、直接免疫荧光等方法,4株野生型VZV病毒得到鉴定;②临床分离的野生菌株VZV4的TCID50为10~(-3.08±0.35)/0.2mL,标准菌株VZV-Ellen的TCID50为
【图文】：

图1第3天，未染色，loox图1、2示:可见生长成致密单层vem细胞贴壁良好，图2第3天，未染色，Zoox生长旺盛，分布均匀，死亡细胞数很少见McCyo细胞为成纤维细胞型形态，系双极或三极，细胞呈梭形，边界比上皮型细胞清楚，胞体较大，胞浆丰富。传代48h后，细胞贴壁良好，生长旺盛，，分布均匀，呈纺锤形，层次感强，有双极树突状结构，已形成致密单层(图4)。图3Hela细胞

士研究生学位论文结果结果1Veor细胞、Hela细胞和McCoy细胞的形态学观察实验中细胞生长状态的好坏直接影响着培养的结果。对生长良好细胞在置显微镜下进行了形态学观察。见Veor细胞和Hela细胞为上皮型细胞形，具有扁平不规则多角形，中有圆形核，细胞紧密相连成单层膜。传代4h8，细胞贴壁良好，生长旺盛，分布均匀，层次感强，已形成致密单层(图1一3)。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R752.12

【共引文献】

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本文编号：2639294