人工真皮修复皮肤缺损的临床及基础研究

发布时间：2020-05-21 21:03

【摘要】：目的:在临床治疗及动物皮肤创伤缺损模型中应用人工真皮(Artificial dermal template,ADT)覆盖创面,观察其诱导皮肤及皮肤附属器再生修复的情况,并做进一步研究。方法:动物模型选取300-350g的雄性SD(Sprague Dawley)大鼠,用打孔器在老鼠背部中间两侧的皮肤制作直径1.5cm大小的圆形全层皮肤缺损模型,并用相同大小的医用材料制成隔离环隔绝创面与周围皮肤,隔离环留有一个边长为4mm的开口以连接缺损创面和周围皮肤,4-0Prolene线缝合固定隔离环与创缘皮肤,避免伤口快速收缩导致愈合。以ADT作为实验组,硅胶膜(SF)为对照组覆盖创面,对创面皮肤愈合情况进行观察,于术后不同阶段对隔离环内新生皮肤取材行苏木精—伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)、免疫荧光等检测,分析皮肤及皮肤附属器的再生情况。此外,我们通过Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2/Rosa26-Lac Z转基因小鼠进行了皮肤再生过程中的细胞谱系追踪研究。结果:术后30天,ADT组创面修复后出现毛发生长现象,而SF组未出现。且ADT愈合率高于SF组,P(ADT组,SF组)0.01,两组间有显著统计学差异。ADT组术后14天、28天的Ki67染色结果显示:新生皮肤的毛囊和皮脂腺细胞大多数都表达Ki67,而SF组的细胞大部分不表达Ki67。Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2/Rosa26-Lac Z转基因小鼠新生皮肤的Lgr5阳性细胞的子代细胞群在绝大多数毛囊的外根鞘、内根鞘和毛囊隆突细胞中均被发现,然而,正常皮肤中仅在数个毛囊的隆突区中能观察到阳性标记细胞。结论:人工真皮为创面修复提供适宜的条件从而诱导了皮肤及皮肤附属器的再生,在此过程中人工真皮诱导再生的毛囊细胞部分起源于Lgr5阳性干细胞。
【图文】：

头皮缺损病人的术前创面（A），手术清创后（B）及完全愈合后的创面（C）

图 2：术后第 9 周 Pelnac 硅胶膜自然脱落后伤口面积缩小至 7×4cm，靠近创面边缘的再上皮化区可以观察到许多新生的毛发，这些毛发短而细并且呈弯曲状态，与正常头皮处的头发相比具有明显不同的特征（A）。随后 9 天同一区域毛发的密度增加，毛干生长得更长，未上皮化的肉芽组织区可以清楚的看到 2 根新生的毛发（黑色箭头所示）（B）。术后 16 周，，创面面积缩小到 4×2cm，伤口边缘的毛发分布范围与 6 周前相似，在未上皮化的创面区观察到 4 根新生毛发（C）。术后18 周，伤口面积进一步缩小到 3×1.5cm，并且在该区域可见 2 根毛发（D）。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R751

【参考文献】

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本文编号：2674899