Wnt信号转导通路在皮肤肿瘤中的作用研究

发布时间：2020-06-09 08:30

【摘要】：Wnt信号转导通路,即由Wnt基因编码产物所介导的信号转导通路,其不仅在胚胎发育调控中起至关重要的作用,而且与肿瘤的发生、发展也密切相关。Wnt信号通路与人类肿瘤的关系,是国际前沿的一个研究热点。大量实验证实,在许多人类肿瘤如结直肠癌及肝癌、肺癌等,Wnt信号转导通路中的APC(adenomatous polyposis coli,结直肠腺瘤性息肉病基因产物)、β-catenin(β-连环蛋白)等成分发生了遗传改变。这些基因的突变导致了β-catenin在细胞浆内异常积累并移位至细胞核内,与LEF-1(lymphoid enhancing factor-1,淋巴样增强因子)相作用,激发Wnt信号通路下游靶基因的活化。其中β-catenin是Wnt信号转导通路的正向调节因素,APC是负向调节因素,LEF-1则在激活下游靶基因中发挥重要作用。本实验旨在研究Wnt信号通路中这三种重要成分在皮肤良、恶性肿瘤中的表达及临床、病理意义,并对其异常表达与肿瘤发生、发展及预后的关系进行初步探讨。 第一部分 APC、β-catenin、LEF-1在良、恶性黑素细胞肿瘤及角质形成细胞肿瘤中的表达 本实验采用免疫组织化学和原位杂交的方法,检测了皮内痣、恶性黑素瘤及脂溢性角化病、基底细胞癌中APC、β-catenin、LEF-1蛋白及LEF-1 mRNA的表达情况。结果显示:
【图文】：

双链寡核营酸与线性化Pslinec3er.1一Hlneo的重组质粒经EcoRI和Hindm双酶切后，电泳显示为4125Pb及160帅的2个条带，证实双链寡核营酸成功克隆入线性化载体psileneer3.l一HIne。。(图2一2)阅一一20001000750500250100阅一4125160图2一2重组质粒Pslineec3r.1一HI几EF一1的双酶切鉴定结果Fig.2一2AgroseelertoPhoresisofreeombinedPlasmiddigesteddoublerestrieteden习nleM:marker;A:PSilencer3.1一Hl/siRNAI:B:Psilencer3.l一HI/siRNAZ。二者经EeoRI和HindHI双酶切后，电泳显示为4125bp及160bp的2个条带。

2.重组质粒DNA全长测序将酶切鉴定后的重组质粒送上海基康生物技术公司，，用F〔40)通用引物测序，结果完全正确。(图2一3，图2一4)将重组质粒命名为Psileneer3.1一Hl/siRNAI、Psilencer3.1一HI/siRNAZ。图2一3psilenee3r.l一HI/siNRAI测序结果Fig.2一3SequeneeofPsilneeer3.l一HI/siRNAI
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2005
【分类号】：R739.5

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本文编号：2704419