紫外线对HaCaT细胞结合珠蛋白表达的影响

发布时间：2020-06-28 06:27

【摘要】： 前言 结合珠蛋白(haptoglobin，Hp)属α_2-唾液酸糖蛋白，是急性期蛋白之一，主要由肝脏合成，也可在脂肪细胞、皮肤、脾、肌肉、肺内等合成，广泛分布于人及其他哺乳动物体液中。Hp在急性溶血时，可与血红蛋白结合，减少铁的流失，并保护肾脏，在抗感染、抗炎症、损伤组织修复、抗氧化及维持内环境稳定的过程中亦发挥重要作用。据报道Hp可以抑制培养状态下表皮内朗格汉斯细胞(LC)转变为抗原递呈细胞。我科用原位杂交技术证实：角质形成细胞等上皮来源的细胞是正常人皮肤组织中表达Hp mRNA的主要细胞，同时在HaCaT细胞中也发现有Hp mRNA及蛋白质表达。紫外线可上调HaCaT细胞Hp mRNA表达，并且随照射时间，Hp mRNA表达呈时相变化。然而紫外线照射HaCaT细胞后Hp的蛋白水平表达情况尚无相关报道。本研究通过免疫组化方法，探讨紫外线对HaCaT细胞Hp表达的影响。 材料和方法 一、实验材料 1、HaCaT细胞：2000年10月由何春涤教授从德国the Free University of Berlin引进并冻存于液氮中； 2、主要试剂和物品：鼠抗人Hp mAb，生物素标记的羊抗小鼠IgG，辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素； 3、主要仪器：细胞培养箱，SS-03紫外线光疗仪。 二、实验方法 1、365nm UVA 8J／cm~2、311nm UVB 80mJ／cm~2分别照射HaCaT细胞。照射后6小时、24小时、48小时收获细胞(每24小时换新鲜培养液)； 2、用0.25％胰蛋白酶液将培养的HaCaT细胞制成细胞悬液，并用细胞离心机制成细胞甩片； 3、用抗Hp mAb、生物素标记的羊抗小鼠IgG及辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素检测HaCaT细胞中的Hp。 结果 365nmUVA、311nmUVB照射后6小时和48小时的HaCaT细胞Hp阳性。正常对照HaCaT细胞和365nmUVA、311nmUVB照射后24小时的HaCaT细胞始终未检测到Hp阳性。 结论 365nmUVA、311nmUVB均可使HaCaT细胞Hp表达水平升高，且具有时相性。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R751
【图文】：

黔汽图2， 3llnmj.巨..口.‘~UvB照射后6小时的HaCaT细胞胞核中Hp阳性(放大倍数400X)图3，紫外线照射后6小时，相同时段收集的对照组HaCaT细胞胞核中Hp阴性(放大倍数40Ox)

紫外线照射后6小时，相同时段收集的对照组HaCaT细胞胞核中Hp阴性(放大倍数40Ox)

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本文编号：2732676