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基于iTRAQ技术的寻常型银屑病(血虚证)的蛋白组学初探

发布时间:2017-03-30 10:10

  本文关键词:基于iTRAQ技术的寻常型银屑病(血虚证)的蛋白组学初探,,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的:对血虚证寻常型银屑病患者的血清蛋白进行初探研究,以期发现血虚证寻常型银屑病患者血清中与健康人相比具有差异性的蛋白质组,并对其具有差异的蛋白质组进行量化分析,从而为血虚证寻常型银屑病的辨证分型提供微观量化依据。同时为寻常型银屑病的临床治疗和临床疗效评价提供方法及客观、稳定的指标,以及为寻常型银屑病其他证型或其他疾病的辨证分型的的微观量化研究提供思路。方法:采用iTRAQ技术,对血虚证寻常型银屑病患者的血清蛋白组进行量化研究,并对差异性蛋白组进行统计学分析。结果:1、血虚证寻常型银屑病患者的血清蛋白组与健康对照组比较存在有差异性的蛋白组。2、本实验共鉴定定量了208个蛋白质(Protein),血虚证寻常型银屑病患者血清蛋白组与健康对照组相比,有109个蛋白质差异存在统计学意义(P0.05)。3、有差异性的蛋白主要集中体现在以下几种蛋白质组上:凝血相关蛋白、脂蛋白类蛋白、免疫相关蛋白、肿瘤相关蛋白、角蛋白相关蛋白、血红蛋白相关蛋白、细胞外基质类蛋白、维生素相关蛋白等。结论:血虚证寻常型银屑病患者的血清蛋白与健康对照组比较确实存在具有差异性的蛋白组。这些差异性蛋白中,凝血相关蛋白、脂蛋白类蛋白、免疫相关蛋白、肿瘤相关蛋白、角蛋白相关蛋白、血红蛋白相关蛋白、细胞外基质类蛋白、维生素相关蛋白等都可能与血虚证寻常型银屑病有关。
【关键词】:iTRAQ技术 蛋白组学 寻常型银屑病 血虚证
【学位授予单位】:成都中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R758.63
【目录】:
  • 中文摘要2-3
  • Abstract3-7
  • 缩略词表7-8
  • 引言8-10
  • 第一部分:资料、方法10-21
  • 1. 研究类型10
  • 2. 研究资料10-12
  • 2.1 诊断标准10-11
  • 2.1.1 西医诊断标准10-11
  • 2.1.2 中医证型诊断标准11
  • 2.2 纳入标准11
  • 2.3 病例排除标准11-12
  • 2.4 病例剔除标准12
  • 2.5 研究病例数12
  • 2.6 样品采集12
  • 3. iTRAQ实验12-19
  • 3.1 iTRAQ实验原理12-14
  • 3.2 iTRAO技术路线14-15
  • 3.3 项目实验流程15
  • 3.4 实验仪器和试剂15-17
  • 3.4.1 实验仪器15-16
  • 3.4.2 药品试剂16-17
  • 3.5 实验方法17-19
  • 3.5.1 样品制备17
  • 3.5.1.1 样品信息17
  • 3.5.1.2 制备方法17
  • 3.5.1.3 SDS-PAGE电泳17
  • 3.5.2 酶解和肽段定量17-18
  • 3.5.3 肽段标记18
  • 3.5.4 SCX分级18-19
  • 3.5.5 质谱分析19
  • 3.5.5.1 毛细管高效液相色谱19
  • 3.5.5.2 质谱鉴定19
  • 4 数据分析19-21
  • 4.1 原始质谱数据19-20
  • 4.2 数据库20
  • 4.3 Mascot搜索20-21
  • 4.4 定量分析21
  • 第二部分:实验结果21-25
  • 1. 组间基线比较21-22
  • 2. 定量结果22
  • 3. SDS-PAGE电泳22-23
  • 4. 酶解肽段浓度测定23
  • 5. 蛋白质鉴定结果23-24
  • 6. 生物信息学(GO分析)24
  • 7. 显著性差异蛋白质定量统计24-25
  • 8. 银屑病相关的蛋白质组NCBI查询结果25
  • 第三部分 讨论25-42
  • 1. iTRAQ技术及其他蛋白质组学相关技术25-26
  • 2. 蛋白组学及与寻常型银屑病的相关性26-28
  • 3. 血虚证寻常型银屑病相关蛋白质组分析28-42
  • 3.1 凝血相关蛋白28-31
  • 3.1.1 凝血系统相关蛋白28-30
  • 3.1.2 抗凝系统相关蛋白30-31
  • 3.2 脂蛋白类相关蛋白31-33
  • 3.3 免疫相关类蛋白33-36
  • 3.4 肿瘤病相关类蛋白质组36-37
  • 3.5 角蛋白类相关蛋白37
  • 3.6 甲状腺素结合球蛋白TBG37-38
  • 3.7 血红蛋白类相关蛋白38-39
  • 3.8 细胞外基质类蛋白39-40
  • 3.9 激肽类相关蛋白40-41
  • 3.10 维生素相关蛋白41-42
  • 结论42-43
  • 问题和展望43-44
  • 致谢44-45
  • 参考文献45-48
  • 文献综述48-53
  • 文献综述参考文献52-53
  • 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果53-54

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本文编号:276847


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