对衣原体蛋白pGP3及其M段抑制小鼠银屑病样皮炎的研究

发布时间：2020-10-12 05:46

　　 [目的]研究衣原体蛋白pGP3及其M段通过结合LL-37抑制小鼠银屑病样皮炎的进展及对小鼠体内炎性因子IL-17、IL-22、IFN-γ水平的影响。[方法]通过GST-pulldown实验体外检测pGP3与LL-37的结合及其结合点。通过动物实验研究pGP3及其M段对IMQ造模的小鼠银屑病样皮炎的抑制作用及对部分炎性因子水平的影响。将48只体重18-20g、6-8周龄的BALB/c雌性小鼠随机均分6组,包括正常组、IMQ组,pGP3局部外涂组、pGP3局部多点皮下注射组,pGP3M局部外涂组、pGP3M局部多点皮下注射组。每组每日早上除正常组小鼠外,均定时定量涂抹IMQ。每组均每日傍晚除正常组及IMQ组外,均定时定量应用蛋白干预。连续干预7天,观察小鼠每日皮损变化并拍照,依据PASI评分标准对小鼠皮损严重程度评分。对IMQ组及pGP3、pGP3M外涂组小鼠右耳IMQ造模并外涂相应蛋白,每日测量小鼠耳朵厚度。于蛋白干预后的第8天处死小鼠取小鼠皮损组织,一部分组织制备石蜡切片,HE染色评估病理表现,另一部分组织留做RT-PCR检测IL-17、IL-22、IFN-γmRNA水平。最后统计所有结果数据,分析比较不同干预方法对银屑病皮损的影响。[结果]所有IMQ造模的小鼠均出现典型银屑病样皮损及病理组织学表现。与IMQ组相比,4组蛋白干预组皮损、病理表现改善程度及PASI评分下降更明显,且到第5-6天时皮损开始消退,而IMQ组皮损会持续发展至第7-8天。外涂pGP3、pGP3M组测得的耳朵厚度也比IMQ组增厚缓慢且更早开始恢复,这2组蛋白干预组之间无明显差别。但4组蛋白干预组皮损对比,Ext-pGP3组皮损改善程度及PASI评分下降不如其余3组更显著。皮损内IL-17、IL-22、IFN-γ表达水平,4组蛋白干预组均较IMQ组下降显著(P0.05)。但Inj-pGP3组较Ext-pGP3组IL-17、IL-22、IFN-γ表达水平下降更显著(P0.05)。Inj-pGP3M组较Ext-pGP3M组IL-17、IL-22、IFN-γ表达水平下降无统计学差异(P0.05)。[结论]衣原体蛋白pGP3及其M段蛋白通过结合LL-37下调皮损内IL-17A、IL-22、IFN-γ表达,有效改善IMQ造模的小鼠银屑病样皮损。
【学位单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R758.63
【部分图文】：

1 pGP3 的凝胶电泳条带 图 2 pGP3M 的凝胶电泳条带 pull down 实验结果-pGP3、GST-pGP3N、GST-pGP3M、GST-pGP3C 的 GST pul1、LL-37：7kDa 处可见单一条带，提示抗 LL-37 抗体特异、GST beads+LL-37：无条带出现，提示 GST 不能与 LL-37 ST-pGP3fl：主要出现 2 条条带，下面的 1 条代表抗 LL-37 抗L-37，上面的 1 条代表 LL-37+GST-pGP3fl 形成的稳定复合ST-pGP3N：无条带出现，提示 LL-37 不能与 GST-pGP3N 结、LL-37+GST-pGP3M：主要出现 2 条条带，下面的 1 条代表性识别的 LL-37，上面的 1 条代表 LL-37+GST-pGP3M 形成LL-37+GST-pGP3C：无条带出现，提示 LL-37 不能与 GST-

1 pGP3 的凝胶电泳条带 图 2 pGP3M 的凝胶电泳条带 pull down 实验结果-pGP3、GST-pGP3N、GST-pGP3M、GST-pGP3C 的 GST pul1、LL-37：7kDa 处可见单一条带，提示抗 LL-37 抗体特异、GST beads+LL-37：无条带出现，提示 GST 不能与 LL-37 ST-pGP3fl：主要出现 2 条条带，下面的 1 条代表抗 LL-37 抗L-37，上面的 1 条代表 LL-37+GST-pGP3fl 形成的稳定复合ST-pGP3N：无条带出现，提示 LL-37 不能与 GST-pGP3N 结、LL-37+GST-pGP3M：主要出现 2 条条带，下面的 1 条代表性识别的 LL-37，上面的 1 条代表 LL-37+GST-pGP3M 形成LL-37+GST-pGP3C：无条带出现，提示 LL-37 不能与 GST-

GSTpulldown结果
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本文编号：2837731