姜黄挥发油对人皮肤鳞癌SCL-1细胞增殖、迁移和侵袭作用及其促凋亡机制研究

发布时间：2020-11-13 20:29

　　 目的:研究姜黄挥发油(TVO)对人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞体外增殖、迁移与侵袭的影响,初步探讨其凋亡的作用机制。方法:运用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度姜黄挥发油在不同时间段(24h、48h、72h)对人皮肤鳞癌SCL-1细胞体外增殖的影响;细胞划痕和细胞侵袭实验检测姜黄挥发油对人皮肤鳞癌SCL-1细胞体外迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术分析及倒置显微镜观察确定姜黄挥发油诱导SCL-1细胞的诱导凋亡率;蛋白免疫印记(Western blot)检测姜黄挥发油对人皮肤鳞癌SCL-1细胞Survivin及Caspase-3蛋白表达量变化的影响。结果:通过MTT、细胞划痕实验及细胞侵袭实验提示姜黄挥发油对SCL-1细胞的体外增殖、迁移和侵袭具有明显抑制作用。MTT法检测结果表明姜黄挥发油能够有效抑制皮肤鳞癌SCl-1细胞增殖,随姜黄挥发油浓度增加,作用时间加长,姜黄挥发油对细胞SCL-1抑制增殖作用越明显,呈一定时间-浓度依赖性。倒置显微镜下观察经姜黄挥发油(5、10、20、40、80mg/L)处理SCL-1细胞48h后,与对照组相比较,SCL-1细胞增殖速度逐渐减慢,贴壁性逐渐降低,随药物浓度越高细胞间隙增大越明显;可见细胞胞体变圆、变小、甚至脱落,可见漂浮细胞;流式细胞仪检测结果提示经姜黄挥发油干预过的SCL-1细胞,随着姜黄挥发油浓度不断增加,凋亡率明显增加;80mg/L姜黄挥发油抑制率达33%(P0.05)。选择浓度相对较低的姜黄挥发油(10、20mg/L)为终浓度实验组,通过细胞划痕试验、细胞侵袭试验检测姜黄挥发油对皮肤鳞癌SCL-1细胞迁移、侵袭的影响,结果发现,与对照组(DMSO组)相比姜黄挥发油能显著降低皮肤鳞癌细胞的迁移与侵袭能力(P0.05);Western blot检测姜黄挥发油作用SCL-1细胞48h后,实验浓度Caspase-3蛋白表达量高于对照组,Survivin蛋白表达量明显低于对照组,以20mg/L姜黄挥发油蛋白表达量变化幅度最大。结果表明姜黄挥发油能显著上调凋亡相关蛋白Caspase-3的表达(P0.05),下调Survivin蛋白的表达。结论:姜黄挥发油能够显著抑制人皮肤鳞癌SCL-1细胞的体外增殖、迁移与侵袭能力;且与其浓度呈正相关;Western blot检测结果表明姜黄挥发油能显著上调凋亡相关蛋白Caspase-3的表达(P0.05),下调Survivin蛋白的表达(P0.05);其可能的机制是通过调节凋亡相关蛋白survivin、caspase-3蛋白的表达来实现的。
【学位单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R739.5
【部分图文】：

姜黄的化学结构式
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本文编号：2882609