Prdx1缺失促进角质细胞凋亡抑制皮肤肿瘤形成的机制研究

发布时间：2020-12-06 00:48

　　过氧化物还原酶I（Peroxiredoxin I,Prdx1）是一种过氧化物还原酶,它在过氧化氢介导的信号通路中发挥重要作用。Prdx1既可以清除细胞内活性氧,也可以与细胞内的其他蛋白质相互结合参与到细胞增殖,分化,细胞凋亡和肿瘤的发生过程中。虽然Prdx1在多种器官肿瘤发生过程中的作用及其机制研究较为深入,但是Prdx1在皮肤肿瘤发生过程中的调节作用尚不明确。在本实验中,我们通过建立DMBA/TPA皮肤肿瘤模型,研究在DMBA/TPA诱导的皮肤肿瘤产生过程中Prdx1可能发挥的作用及其机制。在本实验中,我们首先利用DMBA和TPA这两种化合物分别对野生型小鼠和基因敲除型小鼠的背部皮肤处理1周和20周,测量肿瘤直径并计数。我们通过组织病理学方法观察两种基因型小鼠皮肤在短期TPA处理和长期TPA处理后的病理学特征,包括表皮厚度,真皮内炎性细胞浸润和表皮凋亡细胞数量。为了研究Prdx1发挥作用的分子机理,我们对人正常角质细胞系HaCaT细胞进行了Prdx1基因敲降处理,用以研究在DMBA/TPA引发的细胞凋亡过程中Prdx1发挥的作用。结果显示,在TPA处理20周后,Prdx1基因敲除型小... 

【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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英文缩略语表
摘要
英文摘要
1 文献综述
    1.1 引言
    1.2 鳞状细胞癌
    1.3 DMBA/TPA皮肤肿瘤模型
        1.3.1 引发阶段
        1.3.2 促长阶段
        1.3.3 进展阶段
    1.4 Ras突变和细胞凋亡
    1.5 DMBA/TPA皮肤肿瘤模型中的免疫反应
    1.6 Prdx家族
    1.7 研究意义
2 材料和方法
    2.1 实验小鼠
    2.2 实验主要仪器
    2.3 肿瘤诱导
        2.3.1 小鼠准备
        2.3.2 化合物配置
        2.3.3 背部化合物处理
        2.3.4 肿瘤计数和测量
    2.4 小鼠皮肤组织的H&E染色
        2.4.1 实验样品获得
        2.4.2 皮肤组织脱水
        2.4.3 H&E染色
    2.5 免疫印迹（Western blot）
    2.6 Prdx1基因敲降的HaCaT稳定细胞系的建立
        2.6.1 确定最优筛选浓度
        2.6.2 慢病毒转染最适滴度筛选
        2.6.3 转染和扩增
    2.7 MTT法
    2.8 主要实验用试剂
3 结果与分析
    3.1 Prdx1缺失对皮肤肿瘤数量的影响
    3.2 Prdx1缺失对肿瘤形态和体积的影响
    3.3 Prdx1缺失对表皮厚度的影响
    3.4 Prdx1缺失对TPA引发的免疫反应的影响
    3.5 Prdx1缺失对表皮凋亡细胞数量的影响
    3.6 表皮凋亡相关蛋白检测
    3.7 HaCaT细胞Prdx1敲降效果检测
    3.8 Prdx1敲降对过氧化氢诱导的细胞存活率的影响
    3.9 Prdx1敲降对过氧化氢诱导的细胞凋亡的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢
附录
个人简历



本文编号：2900398