内皮抑素基因腺病毒载体表达系统治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

发布时间：2020-12-18 04:10

　　目的:检测内皮抑素基因腺病毒载体表达系统（Ad-mES）体外生物学活性及其治疗小鼠黑色素瘤的效果;初步探讨内皮抑素的抗肿瘤机理。方法:在HEK293细胞内扩增腺病毒,50%组织培养感染剂量法测定其滴度;RT-PCR、Western Blot和ELISA法检测目的基因的表达;MTT法和流式细胞术检测靶细胞的体外生长情况。多因素多水平析因分析法设计测定体内转染率;观察各组小鼠肿瘤的生长、转移和生存率,Western Blot、免疫组化和透射电镜等鉴定组织内目的基因的表达、血管生成和靶细胞的生长。结果:腺病毒的滴度为10¹⁰pfu/ml,靶细胞明确表达内皮抑素基因,Ad-mES抑制内皮细胞的增殖;治疗小鼠黑色素瘤时,取瘤内注射和间隔7天给药Ad的体内转染率最高（MOI=500时,37.33%）。治疗组小鼠平均生存时间延长,肿瘤体积增长减慢,肿瘤新生血管生成减少。结论:Ad-mES对小鼠黑色素瘤有较好的治疗效果。 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

HEK293感染Ad一mES5d(x200)图l一8HEK293细胞感染Ad一GFP5d(x200)

图1一7HEK293感染Ad一mES5d(x200)图l一8HEK293细胞感染Ad一GFP5d(x200)图1一9小量扩增时GFP阳性细胞(x200)图l一10Ad一mES和Ad一GFP浓缩后的终产物图1一11培养72h的黑色素瘤细胞(x200)图1一12培养72h的ECV304细胞(X200)

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【参考文献】：
期刊论文
[1]重组人血管内皮抑制素抗肿瘤效应的应用研究[J]. 刘江秋,李忠义,陈林生,孙亦红,徐璐,汪军远,刘万兴,夏结来.  细胞与分子免疫学杂志. 2001(01)



本文编号：2923327