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MiR-615-3p对黑色素瘤的增殖抑制和辐射增敏作用的研究

发布时间:2020-12-21 15:46
  黑色素瘤具有恶性程度高、生长迅速、预后差等特点,近年来其发病率和死亡率急剧上升,引起较广泛的社会关注。放射治疗是恶性肿瘤治疗的主要手段之一,也是晚期黑色素瘤的主要治疗方法,但治疗中常易出现放疗耐受性增加,直接影响黑色素瘤的治疗效果,如何降低黑色素瘤的放疗耐受并研究其可能存在的相关机制关系到患者的预后生存,对临床治疗意义重大。MicroRNA(miRNA)是一类广泛存在于真核生物长度约为22个核苷酸的小分子单链RNA,目前已知的miRNA最广泛的功能是通过其种子序列识别靶基因mRNA 3’-UTR上的结合位点,抑制其靶基因的表达。研究发现miRNA能调节人类近1/3的基因,miRNA的基因调控作用也是一个复杂的网络状结构,目前越来越多的研究表明miRNA与肿瘤的进展有着密切的关系,并且部分miRNA在肿瘤的放射治疗中也发挥重要作用。研究表明,miR-615-3p可影响多种肿瘤的发生发展,发挥抑制肿瘤的作用,但在黑色素瘤中的作用及其机制仍不清楚,并且其对黑色素瘤放疗疗效的影响尚未见报道。目的:研究miR-615-3p对黑色素瘤A375细胞生物行为的影响,发掘miR-615-3p发挥作用潜在... 

【文章来源】:兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

MiR-615-3p对黑色素瘤的增殖抑制和辐射增敏作用的研究


miRNA的形成和转录后调控[21]

流程图,黑色素瘤,表达谱,高通量


22图 3.1 黑色素瘤外泌体中辐射相关 microRNA 的表达谱和辐射细胞内 miR-615-3p 的表达(A)外泌体 miRNA 高通量测序实验流程图。(B)文库构建流程图。(C)差异表达 miRNA热图(Heatmap)。(D)差异表达 miRNA 火山图(Volcano Plot)。(E)qRT-PCR 检测对照组和射线辐射组细胞中 miR-615-3p 的表达水平。**P<0.01,与对照组比较。3.2 MiR-615-3p 对黑色素瘤生物学行为的影响研究发现,miR-615-3p 可影响多种肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移、周期和凋亡,但 miR-615-3p 对黑色素瘤生物学行为的影响仍不清楚,为进一步了解miR-615-3p 对黑色素瘤增殖、迁移、周期的影响,本研究合成 miR-615-3p 的模拟物(miR-615-3p mimic)和抑制物(miR-615-3p inhibitor),并对其作用分别进行验证。miR-615-3p mimic 转入细胞内,可模拟内源性成熟 miR-615-3p 的高表达水平,增强 miR-615-3p 的调控作用,进行功能获得性(gain-of-function)研究;miR-615-3p inhibitor 则可减弱内源 miR-615-3p 的基因表达,可进行功能缺失性

转染效率,转染,细胞系


位论文 miR-615-3p对黑色素瘤的增殖抑制和辐nction ) 研 究 。 结 合 生 物 信 息 挖 掘 , 通 过 转 染tor,在后续研究中可进一步验证其所调控靶基因的表达5-3p mimic 在 A375 细胞中转染效率的检测5 细胞系分为转染 miR-615-3p mimic 组和转染 mim检测转染 48 h 及 72 h 后 miR-615-3p 的表达水平。结果 72 h 后,转染 miR-615-3p mimic 组 miR-615-3p 表达水NC组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。该实验结果表75 细胞系转染成功,可满足后续实验要求,本研究将对细胞中产生的生物学行为的影响做进一步研究。

【参考文献】:
期刊论文
[1]microRNAs, an active and versatile group in cancers[J]. Jeffrey Liu.  International Journal of Oral Science. 2011(04)
[2]卵巢癌相关基因的筛选与鉴定[J]. 岳文,孙丽亚,李春海,张立新,裴雪涛.  癌症. 2004(02)



本文编号:2930086

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