纳秒脉冲电场消融恶性黑色素瘤引起系统性免疫的改变

发布时间：2021-01-11 11:59

　　目的:探讨纳秒脉冲电场（nsPEFs）消融恶性黑色素瘤对系统性免疫及T细胞杀伤能力的影响。方法:建立C57BL/6恶性黑色素移植瘤模型,经过参数选择,采用脉冲参数为电场峰值30 kV/cm、脉宽100 ns、频率1 Hz、200个脉冲的nsPEFs电击荷瘤小鼠,4天后处死小鼠,提取T淋巴细胞,CCK-8法检测T淋巴细胞活性,流式细胞仪检测CD3⁺CD4⁺T淋巴细胞、CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞、抑制性T细胞（Treg）及髓源抑制性细胞（MDSC）的比例。眼眶采血,提取血清,ELISA法检测外周血中TNF-α、IL-2、IL-10、TGF-β,IFN-γ等因子的含量。结果:黑色素瘤小鼠模型成瘤率100%,nsPEFs处理荷瘤小鼠后,肿瘤体积明显减小,T淋巴细胞增殖。其中CD3⁺CD4⁺T淋巴细胞含量由48%增加至51.2%,CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞含量由39.6%增加至40.4%。Treg细胞由4.3%减少至2.4... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

建立荷瘤小鼠模型AB16黑色素瘤细胞对数期显微镜下形态（40）B接种后7天C57小鼠肿瘤生长情况C处死解剖小鼠后肿瘤在皮下的分布状况

100ns,200 次脉冲处理肿瘤，肿瘤的消融程度更大。A 脉冲装置治疗荷瘤小鼠示意图 。B 成瘤 4 天后未经治疗的荷瘤小鼠肿瘤生长状况 C 30KV,100ns,100 次脉冲治疗荷瘤小鼠，4 天之后，肿瘤生长状况。D 30KV,100ns,200 次脉冲治疗荷瘤小鼠，4 天之后，肿瘤生长状况。根据肿瘤消融面积显示 30KV,100ns,200 次脉冲引起肿瘤的消融面积更大。在小鼠耐受范围之内，30KV,100ns,200 次脉冲治疗恶性黑色素瘤效果最好。2.9.4 30 KV/cm 100 ns 200 次脉冲处理荷瘤小鼠后 T 淋巴细胞活性增加30 KV/cm 100 ns 200 次 nsPEFs 处理荷瘤小鼠 4 d 后，经脾脏提取 T 淋巴细胞，细胞呈悬浮生长（图 4）。培养 24 h、48 h 后，用 CCK-8 检测发现，处理组的 OD 值普遍较大。与未处理组相比，脉冲处理 T 淋巴细胞存活率分别增加 8%、10.2%(P<0.05)，提示经过脉冲的治疗，T 淋巴细胞增殖，脉冲处理肿瘤增强了机体的淋巴细胞的数量，招募到了更多免疫细胞，提高了细胞的免疫功能。

图 4 荷瘤小鼠 T 淋巴细胞：从脾脏提取 T 淋巴细胞，显微镜观察其形态。A 脉冲处理组小鼠（n=10）。B 荷瘤小鼠脾脏形态 C 显微镜下 T 淋巴细胞形态（ 10）图 5 脉冲电击荷瘤小鼠后,肿瘤消融,T 淋巴细胞增殖。相比对照组，实验组 24hT 淋巴细胞存活率增加 8%（P＜0.05）, 48hT 淋巴细胞存活率增加 10.2% (P<0.05)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]中医药调节癌因性疲乏患者免疫功能的研究[J]. 孙春,曾永蕾.  中医药临床杂志. 2017(10)
[2]ⅠB2、ⅡA2期宫颈癌术前新辅助化疗与腔内放疗对比研究[J]. 许少榆,吴素芳,江少如,邓林浩,王继宇.  中国医学创新. 2017(14)
[3]Effects on the Tumor Specific Growth Factor and Tumor Necrosis Factor α in Rats’ Precancerous Lesion of Primary Hepatocellular Carcinoma by Direct Moxibustion at Ganshu（BL 18） Acupoint[J]. 王培,朱江,谢锡亮,睢明河,张秋菊,贾文睿,辛思源,柳杨,侯中伟.  Chinese Journal of Integrative Medicine. 2016(07)
[4]CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群在肿瘤患者外周血中检测的临床意义[J]. 严健,原永明,张舒,彭贤聪.  检验医学. 2013(10)
[5]老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态与T-bet/GATA3基因表达的关系[J]. 陈刚,王清睿,胡少明.  华中科技大学学报(医学版). 2011(05)
[6]ns级陡脉冲诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究[J]. 张仁民,姚陈果,陈新,莫登斌,孙才新.  高电压技术. 2007(02)



本文编号：2970725