用IL-2转基因B 16 黑色素瘤瘤苗与特异性CTL细胞进行小鼠肿瘤免疫治疗的研究

发布时间：2021-01-23 08:08

　　自1989年以来，肿瘤基因治疗的研究有了较大的发展。应用转入细胞因子基因的瘤苗诱导体内抗肿瘤免疫反应治疗肿瘤的方法，是目前肿瘤免疫治疗和基因治疗的热点之一。为提高疗效，寻找新的综合应用方法是一条重要途径。本研究将IL-2 cDNA转入高恶性、高转移性、弱免疫原性的小鼠B₁₆黑色素瘤细胞。系统研究分泌IL2的转基因B₁₆细胞(B₁₆-IL2)对小鼠免疫反应的影响，以探讨其增强机体抗肿瘤免疫能力的机理。同时观察B₁₆-IL2细胞在体外诱导产生针对B₁₆黑色素瘤的特异性杀伤T细胞（CTL）的作用。并将此CTL与B₁₆-IL2瘤苗联合用于荷瘤小鼠的免疫治疗，以期获得比单独应用转基因瘤苗更佳的抗肿瘤疗效。 IL2基因的转导采用逆转录病毒感染法。首先构建了含人IL2 cDNA的逆转录病毒载体XM6-IL2。将其转入ψ—2包装细胞后用G418筛选。Southern杂交证实所有阳性克隆中均有IL2cDNA的整合。产生的逆转录病毒滴度在10³-1... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

IL一2重组逆转录病毒载体酶切鉴定

10.人IL一2cNDA在观6一IL2转染的中一2细胞内的整合1.PG哪一42一ILZ/Hind1112.冲一22083.冲XI‘4.中5.冲Xl116.冲XI157.冲XI冲XIZi9.冲经切丫“几1‘‘、、一‘养瓶内长许多散在的阳性B16细胞克隆(Bl扩ILZ)，)。反复转代20天后，用xL一2eDNA0.7kb长的核普酸ern杂交，检测IL一2基因在Bl。细胞内的整合情况，结因组整合有IL一2oDNA，而野生型B16细胞未检测到I12)

图19.B16一儿2细胞(TEM又10K).IL一2基因转移对Bl。细胞体外生长特性的影响.”H一TdR掺入及生长曲线测定结果表明，IL一2基因转染对B，。细胞生长无明显影响，结果见表3，图20。表3.转染前后B16细胞”H一TdR掺入值比较组别3H一化R掺入(epm)BisBi6一ILZ423.338士89.48450.00士117.17

【参考文献】：
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本文编号：2994871