甲真菌病甲组织DNA提取方法及AP-PCR快速诊断的初步研究

发布时间：2021-01-28 14:28

　　甲真菌病（onychomycosis）,旧称甲癣（tinea unguium）是由致病性真菌感染指、趾甲引起的一种慢性、感染性、传染性皮肤病,是皮肤科常见病、多发病,又是顽固、易复发的难治病。占浅部真菌感染的30%及所有甲病的50%。在普通人群中的发病率为2%¹5%,目前主要依靠临床特征、直接镜检和真菌培养诊断。但KOH法直接镜检阳性率仅为50%⁷5%,且易受标本数量和质量、检验者的经验技术等因素的影响;真菌培养约有30%的假阴性,阳性率波动于25%⁸0%之间,且需要4周方可确定菌种,镜检和培养相结合的正确诊断率约为50%⁷5%,上述问题限制了甲真菌病的快速诊断和治疗。随着新一代内用抗真菌药物广泛应用于临床,这些药物各有特定的抗菌谱,且较昂贵和有明显的副作用,但传统的真菌病诊断方法不能解决快速选药的问题,因此有必要建立一种快速高效且敏感的确诊甲真菌病的方法,以利指导临床用药。近年来分子生物学技术已渗透至科学研究的各个领域,如随机引物PCR（AP-PCR）,mtRNA的限制性酶切分析（RFLP）,探针... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

玻璃珠法菌株DNA结果

琼脂糖凝胶电泳图 1 玻璃珠法菌株 DNA 结果泳道为 Marker，2-6 泳道为红色毛癣菌 DNA，7-9 泳道为白念珠菌珠法从菌株组织中可获得目的 DNA，红色毛癣菌与白均约为 19-20kb。每 100mg 组织可获得约 30ug DNA，但断裂。

图 3 微量提取法菌株 DNA 结果道为 Marker，2-6 泳道为红色毛癣菌 DNA，7-9 泳道为白念珠菌 DNCTAB 微量提取法从菌株组织中可获得目的 DNA，红色毛癣珠菌的分子量均约为 19-20kb。每 100mg 组织可获得约 50ug 链无明显断裂，且 DNA 纯度较好。

【参考文献】：
期刊论文
[1]2002—2003年中国部分地区甲真菌病致病菌流行病学调查报告[J]. 吴绍熙,刘维达,郭宁如,廖万清,李若瑜,王家俊,章强强,席丽艳,冉玉平,赖维,郑岳臣.  临床皮肤科杂志. 2005(09)
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本文编号：3005155