3-甲基腺嘌呤增强ALA-PDT对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的杀伤作用

发布时间：2021-03-25 15:29

　　目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）联合3-甲基腺嘌呤（3-MA）对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的杀伤作用及其机制研究。方法体外培养人皮肤鳞状细胞癌A431细胞,设置不同的ALA浓度（0、0.20、0.40、0.80、1.60 mmol/L）及不同的培养时间（12、24、48 h）,对A431细胞进行ALA-PDT处理,采用MTT法检测细胞增殖活性并计算半抑制浓度(IC₅₀)值。根据实验需要将A431细胞分为空白对照组、ALA-PDT组、3-MA组和ALA-PDT+3-MA组。分组处理后,MTT法检测细胞增殖;流式细胞术分别检测细胞凋亡（Annexin V-FITC/PI双染法）以及细胞线粒体膜电位变化（JC-1染色法）;单丹磺酰尸胺（MDC）染色法观察细胞自噬情况;Western blot检测凋亡和自噬相关蛋白的表达水平。结果 ALA-PDT对A431细胞的增殖活性有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。与对照组比较,ALA-PDT组细胞增殖活性、线粒体膜电位均显著降低（P<0.05）,而细胞凋亡与自噬水平显著提高（P<0.05）,Cle... 

【文章来源】：中国皮肤性病学杂志. 2020,34(06)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

各组A431细胞线粒体膜电位的变化

各组A431细胞胞浆中Cyt C蛋白表达水平

与对照组比较,ALA-PDT组细胞自噬标志物蛋白LC-3Ⅱ以及自噬相关蛋白Beclin1均显著上调(t=32.63,17.33;P<0.05),而3-MA组差异无统计学意义(t=0.40,1.37;P>0.05);与ALA-PDT组比较,ALA-PDT+3-MA组LC-3Ⅱ和Beclin1蛋白则显著下调(t=21.32,16.01;P<0.05),见图6。MDC染色结果显示,与对照组比较,ALA-PDT组被MDC荧光标记的自噬体明显增多,荧光强度加强,而3-MA组与对照组比较差异无统计学意义;与ALA-PDT组比较,ALA-PDT+3-MA组被MDC荧光标记的自噬体又显著减少,荧光强度明显减弱,见图7。图5 3-MA与ALA-PDT联用对A431细胞凋亡相关蛋白表达的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]皮肤鳞状细胞癌的研究进展[J]. 李超,陈永锋.  皮肤性病诊疗学杂志. 2019(01)
[2]ALA-PDT对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞体外活性的影响[J]. 姜彬,陈办成,于波,杨丽丽,刘小明,陈廷婷,叶庭路.  中国皮肤性病学杂志. 2018(12)
[3]细胞自噬与肿瘤微环境的关系研究进展[J]. 雷思雨,陈曼曼,陈斌,李玉云.  蚌埠医学院学报. 2018(07)
[4]5-氨基酮戊酸光动力疗法在皮肤性病科的应用进展[J]. 余兵,高君,肖文.  中国皮肤性病学杂志. 2016(10)
[5]5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗皮肤恶性肿瘤及癌前病变的研究进展[J]. 周萌,刘保国,顾静.  中国激光医学杂志. 2016(03)



本文编号：3099905