角质细胞特异性Smad4剔除小鼠脱毛并发生皮肤癌

发布时间：2021-04-26 00:54

　　TGF-β超家族分子在调节细胞增殖、谱系分化、迁移、黏附和凋亡过程中具有重要作用。Smad4分子是TGF-β超家族分子信号通路的中心介导者。为了进一步深入研究TGF-β超家族分子在皮肤发育过程中的功能,我们利用Cre-loxP系统研制了角质细胞特异性Smad4剔除小鼠。 利用Southern Blot和ROSA26报告小鼠研究了角质细胞特异性Cre重组酶（K5-Cre）转基因小鼠中Cre重组酶表达的组织特异性。结果显示,Cre重组酶表达于所有含有角质细胞的组织中,表明角质细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠可以作为在角质细胞进行基因剔除的工具小鼠。将该小鼠和Smad4条件基因打靶小鼠交配,得到角质细胞特异性Smad4剔除小鼠。半定量RT-PCR结果显示,在基因剔除小鼠的表皮几乎检测不到Smad4的转录本,说明K5-Cre介导的重组在角质细胞中有效地阻断了Smad4的表达。 Smad4剔除小鼠从出生后第20天开始进行性毛发脱落。系统的组织病理学分析结果显示Smad4剔除小鼠皮肤基底层明显增厚、毛囊肥大且不能进入退化期。TUNEL检测结果显示,Smad4剔除小鼠退化期角质细胞不能发... 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
    1.1 皮肤、毛囊结构及毛囊周期循环
    1.2 TGF-β超家族分子信号传导途径
    1.3 TGF-β超家族分子在毛囊周期循环中的作用
    1.4 TGF-β与生长控制
    1.5 TGF-β与凋亡
    1.6 TGF-β与肿瘤
        1.6.1 TGF-β在肿瘤发生过程中扮演两种截然不同的角色
        1.6.2 肿瘤中TGF-β受体的突变
        1.6.3 肿瘤中Smad的突变
    1.7 研究的目的和意义
第一部分 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠的获得
    1 材料和方法
        1.1 实验动物
        1.2 小鼠基因组DNA的制备
        1.3 基因型鉴定
        1.4 LacZ染色
        1.5 石蜡包埋、切片及复染
        1.6 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠的获得和基因型鉴定
        1.7 Southern Blot
        1.8 RT-PCR
    2 结果
        2.1 K5-Cre转基因小鼠中Cre重组酶的表达分布
        2.2 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠的获得
    3 讨论
第二部分 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠脱毛并发生皮肤癌
    1 材料和方法
        1.1 HE染色和免疫组织化学
        1.2 BrdU掺入法检测增殖
        1.3 普通原位杂交
    2 结果
        2.1 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠发生进行性脱毛
        2.2 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠毛囊不能进入退化期
        2.3 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠表皮和毛囊过度增生
        2.4 角质细胞特异性Smad4剔除小鼠发生皮肤癌
    3 讨论
结论
参考文献
在读期间发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立[J]. 毛春明,杨晓,程萱,吕娅歆,周江,黄翠芬.  遗传学报. 2003(05)



本文编号：3160415