银屑病中NLRP3炎症小体通过调控Treg/Th17失衡对角质形成细胞增殖及趋化能力的影响

发布时间：2021-05-10 15:20

　　目的探讨银屑病中NLRP3炎症小体通过调控Treg/Th17失衡对角质形成细胞增殖及趋化能力的影响。方法通过qRT-PCR、Western Blot、免疫组织化学和免疫荧光化学检测NLRP3在银屑病患者受损皮肤中的表达。体外以10 ng/mL的KGF刺激HaCaT细胞建立银屑病的细胞模型,通过慢病毒介导的sh-NLRP3转染细胞,qRT-PCR和Western blot分析NLRP3表达,CCK-8和Transwell小室分别检测细胞增殖和趋化能力,ELISA检测炎性因子IL-17A、IL-23、IL-1β和趋化因子CXCL1、CXCL2、CXCL8的分泌水平。体内将慢病毒介导的sh-NLRP3注射入小鼠背部局部皮肤,再通过5%咪喹莫特（IMQ）诱导小鼠银屑病样皮损模型,qRT-PCR检测NLRP3和Cytokeratin 14在皮肤组织的表达,PASI评分评价小鼠银屑病皮损面积和疾病严重程度,HE染色观察皮肤组织病理改变,测量皮肤厚度,qRT-PCR检测炎性因子IL-17A、IL-23、IL-1β和趋化因子CXCL1、CXCL2、CXCL8的表达,流式细胞术检测Th17、Treg细胞... 

【文章来源】：中国皮肤性病学杂志. 2020,34(11)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 临床样本
    1.2 细胞
    1.3 动物
    1.4 药品和试剂
    1.5 银屑病细胞模型的建立与检测
        1.5.1 细胞的培养
        1.5.2 细胞转染
        1.5.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
        1.5.4 Western blot
        1.5.5 免疫组织化学染色和免疫荧光化学染色
        1.5.6 构建银屑病细胞模型
        1.5.7 Transwell小室实验
        1.5.8 CCK-8
        1.5.9 ELISA
    1.6 银屑病小鼠模型的构建与相关检测
        1.6.1 构建银屑病小鼠模型
        1.6.2 小鼠PASI评分
        1.6.3 组织病理学分析
        1.6.4 流式细胞术
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 NLRP3在银屑病患者受损皮肤中的表达
    2.2 NLRP3在银屑病细胞模型中的表达及对HaCaT细胞增殖的调控情况
    2.3 体外敲除NLRP3对炎性因子和趋化因子表达的影响
    2.4 NLRP3在银屑病小鼠模型中的表达及敲除NLRP3银屑病小鼠皮肤的影响
    2.5 体内敲除NLRP3对Treg/Th17细胞平衡的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-20a靶向STAT3抑制角质形成细胞增殖参与银屑病的机制[J]. 周蓉,陈振平,黄盼,罗美俊子,潘意,杨志波,王畅.  中国皮肤性病学杂志. 2020(04)
[2]蜈蚣败毒饮对转基因银屑病模型皮损IL-17和IL-23蛋白表达的影响及与皮损指数的相关性[J]. 安月鹏,柏青松,袁锐,杨素清.  中国皮肤性病学杂志. 2019(05)
[3]表皮细胞紧密连接在银屑病发病机制中的作用[J]. 赵京霞,王燕,底婷婷,蒙玉娇,刘宇,翟春燕,李萍.  中国皮肤性病学杂志. 2019(04)



本文编号：3179592