人源性抗角蛋白抗体的高效表达及其作用研究

发布时间：2021-05-15 14:53

　　研究表明，人体内天然存在的抗角蛋白自身抗体（anti-keratin auto antibody,AK auto Ab）是维持机体免疫状态平衡的重要成员。一些病理情况下（如银屑病、接触性皮炎等），AK auto Ab的存在有利于限制病情的进展，促进损伤的修复，对机体具有有益的保护作用。动物实验和体外研究都提示当机体内AK auto Ab水平低下时，人为补充抗角蛋白抗体有可能成为该类疾病新的治疗措施。 目的： 目的基因的高效表达是制备有应用价值的治疗性抗体的重要前提。抗体除用于基础研究外，还可以在临床诊断和治疗中应用，特别是具有低免疫原性、可以快速到达作用靶点和可迅速清除等优点的小分子抗体。我们利用噬菌体抗体库技术筛选获得了高亲和力、高特异性人源性抗角蛋白抗体。为了提高其产量，我们用大肠杆菌包涵体表达然后体外变性、复性的方法及巴氏毕赤酵母表达等不同方法表达小分子抗角蛋白抗体，以得到高表达的抗角蛋白抗体并为其下一步应用研究打下基础。 方法：实验内容共分为3个部分，操作方法简述如下： 1．抗角蛋白Fab抗体在大肠杆菌中的包涵体表达与复性 以已构建好的质粒p3MH／F... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：95 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略语表
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英文摘要
前言
文献回顾
    1 角蛋白及天然抗角蛋白自身抗体
    2 基因工程抗体及其表达策略
实验内容
    1 抗角蛋白Fab抗体在大肠杆菌中的包涵体表达与复性研究
        1.1 实验材料
        1.2 方法与步骤
        1.3 结果
        1.4 讨论
    2 人源性抗角蛋白单链抗体在巴氏毕赤酵母的分泌表达
        2.1 实验材料
        2.2 方法与步骤
        2.3 结果
        2.4 讨论
    3 人源性抗角蛋白抗体Fab段在巴氏毕赤酵母的分泌表达
        3.1 实验材料
        3.2 方法与步骤
        3.3 结果
        3.4 讨论
小结
参考文献
个人简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]毕赤酵母表达系统[J]. 樊建勇.  国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册. 2003(05)
[2]抗角蛋白单克隆抗体5G5对培养角质形成细胞增殖的影响[J]. 张亮,赵小东,刘玉峰,刘彦仿,兰风华.  中华皮肤科杂志. 2001(04)
[3]包含体蛋白质的复性研究进展[J]. 宁云山,李妍,王小宁.  生物技术通讯. 2001(03)
[4]重组包涵体蛋白质的折叠复性[J]. 冯小黎.  生物化学与生物物理进展. 2001(04)
[5]天然抗角蛋白自身抗体抑制角质形成细胞及鳞状细胞癌细胞增殖的作用[J]. 王文清,刘玉峰,赵小东,马翠玲.  中华皮肤科杂志. 2001(03)
[6]天然抗角蛋白自身抗体对体外培养角质形成细胞细胞周期的影响(英文)[J]. 李承新,万业宏,刘玉峰,孙林潮.  第四军医大学学报. 2001(05)
[7]毕赤酵母的密码子用法分析[J]. 赵翔,霍克克,李育阳.  生物工程学报. 2000(03)
[8]抗角蛋白自身抗体研究现状与展望[J]. 王刚,刘玉峰.  中国皮肤性病学杂志. 2000(01)
[9]从半合成噬菌体抗体库中筛选抗角蛋白人抗体[J]. 王刚,化冰,王琰,刘玉峰.  中国免疫学杂志. 2000(01)
[10]酵母表达系统表达外源基因的研究进展[J]. 郑敏,张飞雄,刘丽.  首都师范大学学报(自然科学版). 1999(04)



本文编号：3187835