三七皂苷R1对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞及组织中ROS、PI3K/AKT信号转导通路及蛋白AKR1-C3的作用机制研究
发布时间:2021-07-06 11:10
[目的]瘢痕疙瘩是继发于皮肤创伤、炎症后的一种病理性愈合,其发病机制不明确,前期研究显示磷酯酸肌醇-3 激酶/蛋白激酶 B(Phosphatidylinositol 3-kinase/Protein Kinase B,PI3K/AKT)信号通路在增生性瘢痕形成过程中发挥作用,线粒体应激可能导致瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡异常核心事件之一。由于三七皂苷R1具有抗肝细胞纤维化的作用[1],三七皂苷R1是否能影响瘢痕疙瘩的增殖?其可能的作用机制是什么?本文通过三七皂苷R1干预体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞,检测PI3K/AKT通路相关蛋白及mRNA、ROS、AKR1-C3的表达,探讨三七皂苷R1抑制体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞的可能机制,为进一步了解瘢痕疙瘩发病机制和临床药物作用研究提供实验依据。[方法]1、原代培养成纤维细胞(Fibroblast,FB);实验分组为:瘢痕疙瘩组:对照组,实验组:三七皂苷R1组、LY294002组、NAC组;正常皮肤组:对照组,实验组:三七皂苷R1组、LY294002组、NAC组。用不同浓度LY294002干预瘢痕疙瘩成纤维细胞24小时后,通过CCK-8(Cell ...
【文章来源】:昆明医科大学云南省
【文章页数】:68 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1??,[9],??
、体外分离培养原代成纤维细胞。??10例手术切取的瘢痕疙瘩和6例正常皮肤标本组织,组织块原代培养成纤维细胞,??在倒置显微镜下观察细胞生长及形态,5-7天后瘢痕疙瘩可见较多细胞爬出(见图1),??而正常皮肤8?10天后才可见少数单个细胞贴壁(见图2),细胞呈梭形、长条形。瘢痕??疙瘩细胞约10天左右铺满培养皿的70-80%,正常皮肤细胞约14天作右铺满培养皿的??70-80%?(见图3)。待细胞铺满培养皿约80%-100%?(见图4),用吸管移出组织块,进??行原代细胞第一次传代。??m?w??图1瘢痕疙瘩细胞原代培养5?7天(10〇x)?图2正常皮肤细胞原代培养8?10天(10〇x)??Fig.?1?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?5?to?7?days?Fig.?2?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?8?to?10?days??(100X)?(10〇x)??图3正常皮肤细胞原代培养10天(10
70-80%?(见图3)。待细胞铺满培养皿约80%-100%?(见图4),用吸管移出组织块,进??行原代细胞第一次传代。??m?w??图1瘢痕疙瘩细胞原代培养5?7天(10〇x)?图2正常皮肤细胞原代培养8?10天(10〇x)??Fig.?1?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?5?to?7?days?Fig.?2?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?8?to?10?days??(100X)?(10〇x)??
【参考文献】:
期刊论文
[1]三七改善慢性肾脏病大鼠肾脏纤维化的研究[J]. 徐颖,王丽,吉琳梅,沈宏春,程偲婧,樊均明,文丹. 重庆医学. 2016(33)
[2]三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展[J]. 王莹,禇扬,李伟,马晓慧,魏振平. 中草药. 2015(09)
[3]三七皂苷R1对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号的影响[J]. 普显宏,何媛,黄微,茹金,杨金伟. 现代生物医学进展. 2015(04)
[4]线粒体凋亡途径在瘢痕疙瘩中的作用机制[J]. 施晓晓,汤諹. 中国皮肤性病学杂志. 2014(11)
[5]Smashing Tissue Extraction and HPLC Determination of Active Saponins from Different Parts of Panax notoginseng[J]. SHI Sheng-ming1,2,LIU Yan-ze3,4,TAI Wen2,CHEN Chang-qing2,ZHAO Yu-qing1,5 1.Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110006,China 2.Tianjin Institute of Pharmaceutical Research,Tianjin 300193,China 3.Bio-Organic and Natural Product Laboratory,MRC 311,McLean Hospital/Harvard Medical School,115 Mill Street,Belmont,MA 02478,USA 4.Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100193,China 5.Key Laboratory of Structure-Based Drug Design and Discovery,Ministry of Education,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110016,China. Chinese Herbal Medicines. 2012(04)
[6]复元胶囊及其主要成分淫羊藿苷、三七皂苷R1治疗骨关节炎的分子机制研究[J]. 张文亮,李荣亨,王淑美,周小莉,钟玉. 中国中药杂志. 2011(15)
[7]三七总皂苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1对光化学反应诱导的大鼠肠系膜细静脉血栓的抑制作用——三七主要成分抑制细静脉血栓[J]. 王芳,刘育英,刘涟祎,曾庆江,樊景禹,王传社,韩晶岩. 世界科学技术-中医药现代化. 2008(03)
[8]410例辽籍汉族瘢痕疙瘩临床流行病学分析[J]. 舒春梅,何春涤,刘勇,庞莹,陈洪铎. 中国麻风皮肤病杂志. 2007(07)
[9]瘢痕疙瘩发病机理的研究进展[J]. 陈阳,高建华,宋良萍. 中国美容整形外科杂志. 2006(05)
[10]瘢痕疙瘩一家系调查[J]. 柳青,王芝琪,孙淼,张学. 临床皮肤科杂志. 2004(04)
博士论文
[1]人增生性瘢痕成纤维细胞PI3K/Akt信号通路的作用及其与结缔组织生长因子相关性研究[D]. 刘剑毅.第三军医大学 2008
[2]中国汉族瘢痕疙瘩致病基因初步连锁分析和相关基因多态性的研究[D]. 刘勇.中国医科大学 2007
硕士论文
[1]三七皂苷R1对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞Wnt/β-catenin信号转导通路的作用机制研究[D]. 费猛.昆明医科大学 2017
[2]三七单体成分R1、Rd的活血化瘀功能及机制研究[D]. 陈重华.四川大学 2003
本文编号:3268130
【文章来源】:昆明医科大学云南省
【文章页数】:68 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1??,[9],??
、体外分离培养原代成纤维细胞。??10例手术切取的瘢痕疙瘩和6例正常皮肤标本组织,组织块原代培养成纤维细胞,??在倒置显微镜下观察细胞生长及形态,5-7天后瘢痕疙瘩可见较多细胞爬出(见图1),??而正常皮肤8?10天后才可见少数单个细胞贴壁(见图2),细胞呈梭形、长条形。瘢痕??疙瘩细胞约10天左右铺满培养皿的70-80%,正常皮肤细胞约14天作右铺满培养皿的??70-80%?(见图3)。待细胞铺满培养皿约80%-100%?(见图4),用吸管移出组织块,进??行原代细胞第一次传代。??m?w??图1瘢痕疙瘩细胞原代培养5?7天(10〇x)?图2正常皮肤细胞原代培养8?10天(10〇x)??Fig.?1?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?5?to?7?days?Fig.?2?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?8?to?10?days??(100X)?(10〇x)??图3正常皮肤细胞原代培养10天(10
70-80%?(见图3)。待细胞铺满培养皿约80%-100%?(见图4),用吸管移出组织块,进??行原代细胞第一次传代。??m?w??图1瘢痕疙瘩细胞原代培养5?7天(10〇x)?图2正常皮肤细胞原代培养8?10天(10〇x)??Fig.?1?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?5?to?7?days?Fig.?2?The?primary?cultured?of?keloid?cell?after?8?to?10?days??(100X)?(10〇x)??
【参考文献】:
期刊论文
[1]三七改善慢性肾脏病大鼠肾脏纤维化的研究[J]. 徐颖,王丽,吉琳梅,沈宏春,程偲婧,樊均明,文丹. 重庆医学. 2016(33)
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[3]三七皂苷R1对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号的影响[J]. 普显宏,何媛,黄微,茹金,杨金伟. 现代生物医学进展. 2015(04)
[4]线粒体凋亡途径在瘢痕疙瘩中的作用机制[J]. 施晓晓,汤諹. 中国皮肤性病学杂志. 2014(11)
[5]Smashing Tissue Extraction and HPLC Determination of Active Saponins from Different Parts of Panax notoginseng[J]. SHI Sheng-ming1,2,LIU Yan-ze3,4,TAI Wen2,CHEN Chang-qing2,ZHAO Yu-qing1,5 1.Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110006,China 2.Tianjin Institute of Pharmaceutical Research,Tianjin 300193,China 3.Bio-Organic and Natural Product Laboratory,MRC 311,McLean Hospital/Harvard Medical School,115 Mill Street,Belmont,MA 02478,USA 4.Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100193,China 5.Key Laboratory of Structure-Based Drug Design and Discovery,Ministry of Education,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110016,China. Chinese Herbal Medicines. 2012(04)
[6]复元胶囊及其主要成分淫羊藿苷、三七皂苷R1治疗骨关节炎的分子机制研究[J]. 张文亮,李荣亨,王淑美,周小莉,钟玉. 中国中药杂志. 2011(15)
[7]三七总皂苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1对光化学反应诱导的大鼠肠系膜细静脉血栓的抑制作用——三七主要成分抑制细静脉血栓[J]. 王芳,刘育英,刘涟祎,曾庆江,樊景禹,王传社,韩晶岩. 世界科学技术-中医药现代化. 2008(03)
[8]410例辽籍汉族瘢痕疙瘩临床流行病学分析[J]. 舒春梅,何春涤,刘勇,庞莹,陈洪铎. 中国麻风皮肤病杂志. 2007(07)
[9]瘢痕疙瘩发病机理的研究进展[J]. 陈阳,高建华,宋良萍. 中国美容整形外科杂志. 2006(05)
[10]瘢痕疙瘩一家系调查[J]. 柳青,王芝琪,孙淼,张学. 临床皮肤科杂志. 2004(04)
博士论文
[1]人增生性瘢痕成纤维细胞PI3K/Akt信号通路的作用及其与结缔组织生长因子相关性研究[D]. 刘剑毅.第三军医大学 2008
[2]中国汉族瘢痕疙瘩致病基因初步连锁分析和相关基因多态性的研究[D]. 刘勇.中国医科大学 2007
硕士论文
[1]三七皂苷R1对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞Wnt/β-catenin信号转导通路的作用机制研究[D]. 费猛.昆明医科大学 2017
[2]三七单体成分R1、Rd的活血化瘀功能及机制研究[D]. 陈重华.四川大学 2003
本文编号:3268130
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/pifb/3268130.html
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