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XPA蛋白在修复UVB损伤中的作用以及EGCG干预机制的研究

发布时间:2021-07-20 16:48
  研究背景:目光中的紫外线(UV),主要为长波紫外线(UVA)和中波紫外线(UVB),是导致皮肤日晒伤、光老化及皮肤癌的重要因素。在相同剂量下,UVB的光损伤作用比UVA约大800—1000倍。UVB辐射可导致自由基及活性氧的形成,引起细胞因子产生与分泌,局部及系统免疫抑制,细胞DNA损伤及突变频率增加,甚至导致皮肤光老化及皮肤癌肿的发生。皮肤是抵抗紫外线作用的第一道防线,表皮中的角质形成细胞是中波紫外线(UVB)照射的重要靶位。UVB辐射可引起表皮细胞DNA损伤,产生光产物,主要为6-4光产物((6-4)PPs)和环丁烷嘧啶二聚体(CPDs),这类光产物主要通过核苷酸切除修复(NER)进行切除修复。NER包括:①损伤识别;②损伤部位DNA双链的解螺旋;③损伤部位的双切除;④包含损伤的DNA延伸链的移除;⑤DNA的再合成和连接。XPA、ERCC1、增殖细胞核抗原(PCNA)、复制蛋白A(RPA)、p53等30多种基因产物参与NER过程。XPA蛋白特异性识别紫外线诱导的损伤DNA,启动NER。XPA与RPA或者ERCC1结合。ERCC1多肽对于损伤DNA的NER修复是必需的。在哺乳动物细胞... 

【文章来源】:南京医科大学江苏省

【文章页数】:114 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

XPA蛋白在修复UVB损伤中的作用以及EGCG干预机制的研究


不同浓度EGCG干预处理对UVB辐射后HaCaT细胞活性的影响

照光,组图


原代KC进行细胞爬片,然后分组进行UVB辐射,再进行免疫组化实验。与照光组相比,非照光组和阴性对照组(以PBS代替一抗作为阴性对照)均未见到阳性细胞,如图1一1到图1一3所示。从这些图片中可以看出,UVB辐射可以损伤细胞,表现为DNA损伤,产生光产物,即表现为图中具有棕揭色细胞核的阳性细胞。。,.,.1·0。..一1.户.夕.’.,.尹户.汤匆奋冷令、一‘.:..r

产物,情况,损伤作用,细胞损伤


八nU八︺n︶0︸I)︵ 0on甘侍匕八月q乙nR八 bA工Q乙︵令界裂00囚\令︶绷坦纂界、里UVB辐射后时间(h)图2一 7UvB辐射后光产物产生和清除情况{白叶阳性细胞夔i王il…|…口。nOU八l)fl﹄I)︺nU八11︵U沈月9自nR︺︵连匕且q山︵令契界00闪\令︶绷坦裂界、里UVB辐射后时间(h)图2一 8uvB辐射后光产物产生和清除情况 3UVB照射剂量对细胞损伤的影响原代Kc进行细胞爬片,然后接受不同剂量(30、60、 90mJ几mZ)UVB照射,4h后进行免疫组化实验。从图3一1到图3一3可以看出, 30mJ/cmZUVB照射后细胞变化较轻,显微镜下的阳性细胞最少,60mjlc时uvB对细胞的损伤作用增大,阳性细胞数增多 ;90mJ/cmZ

【参考文献】:
期刊论文
[1]应用MTT法检测肿瘤化疗药物的敏感性[J]. 徐静,吴锋,梅铭惠.  华夏医学. 2005(01)
[2]羟氯喹及中药对紫外线损伤角质形成细胞保护作用的实验研究(英文)[J]. 骆丹,闵玮,林向飞,吴迪,缪旭.  Journal of Nanjing Medical University. 2004(04)



本文编号:3293206

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