皮肤恶性黑素瘤中uPA、MMP-9基因甲基化的相关研究

发布时间：2021-07-25 15:31

　　目的:（1）研究皮肤恶性黑素瘤中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）基因及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因启动子区甲基化状态与其mRNA表达的关系。（2）探讨uPA、MMP-9基因甲基化在皮肤恶性黑素瘤发生和发展中的作用。方法:（1）体外培养人表皮恶性黑素瘤A375细胞系,采用MTT法观察S-腺苷甲硫氨酸（SAM）对A375细胞增殖的影响。（2）按不接受和接受不同浓度SAM（100,250,400μmol/L）干预2天,3天,5天,分别将A375细胞系设立为对照组和处理组。采用半定量PCR（RT-PCR）法比较对照组和处理组A375细胞系uPA、MMP-9mRNA转录水平的差异。（3）采用甲基化特异性多聚酶链反应法（MS-PCR）比较两组A375细胞系uPA、MMP-9基因启动子区甲基化状态的变化。结果:（1）MTT结果显示SAM对A375细胞增殖有抑制作用。（2）uPA、MMP-9 mRNA在对照组A375细胞中均显著表达,且基因启动子区分别呈完全去甲基化或部分去甲基化状态。（3）经SAM干预后uPA、MMP-9 mRNA表达不同程度降低,并且SAM对基因转录的抑制作用呈剂量和时间依... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

375细胞用不同浓度SAMSAM对A375(0，200，4003，4，5d)，检测A375细胞存活率

0.4S一山<2-J>9比VdnE之利一中门。匡图2一 2SAM对人皮肤恶性黑色素瘤细胞株A375中uPAmRNA的表达水平的影响用不同浓度sAM(0，100，250，400协mol/L)干预A375较对照组和处理组 uPAmRNA的表达水平的差异。细胞系2天，3天，5天后，分别比*P<0.05具有统计学差异3.SAM干预前后人皮肤恶性黑素瘤A375细胞系中MMP一gmRNA表达的差异实验结果发现，MMP一9在A375细胞系中显著表达

硕{学位论文结果图3一 1RT一PCR分析皮肤黑色素瘤细胞株A375经SAM干预前后MMP一gmRNA的表达A:sAM干预5天前后MMP一 9mRNA的表达B:口一a。 tin内参照MMP一9:目的片段(385bp)，口一a。tin内参照(550bp)吸翻 0umol/L巨二〕 100umol/L〔二」250。mol/L ..400umol/L P<0.05 **P<0.01S一QJA田 N--JV叱6E·d一乏乏祠山七门Q叱图3一2用不同浓度5天SAM对人皮肤恶性黑色素瘤细胞株 A375MMP一 9mRNA的表达水平的影响sAM(o， 200，250，礴00科moz/L)干预A375细胞5天后，比较对照组和处理组朋P一 9mRNA的表达水平的差异。 *P<0.05具有统计学差异。

【参考文献】：
期刊论文
[1]uPA基因启动子甲基化与喉鳞状细胞癌的关系[J]. 王大力,王铁,任重.  临床耳鼻咽喉科杂志. 2006(09)
[2]喉癌中尿激酶型纤溶酶原激活剂的表达与肿瘤侵袭转移的关系[J]. 王大力,任重,张勇,张澍,王铁.  中华耳鼻咽喉科杂志. 2004(07)



本文编号：3302294