头皮真皮祖细胞与表皮干细胞体外预聚集激活WNT通路促进体内毛囊的形成

发布时间：2021-10-24 15:23

　　研究背景毛发具有十分重要的生理学和社会学的价值,而脱发一直是医学界的一大难题。为此全球各大医药公司每年投入大量的人力物力以寻求治疗脱发的有效疗法。尽管如此,可供选择的治疗手段依然十分有限,而毛囊相关的研究主要受限于缺乏安全高效的药物筛选系统。类器官作为一种由干细胞为原料,经体外培养自我组装成的三维结构,具有与实际器官相似的特征及功能,为研究器官发育、组织再生及疾病发病机理提供了新的可能。近年来,已成功培育多种上皮类器官,例如乳腺,唾液腺以及结肠和肝管,但是在体外培育毛囊类器官仍是一大难题,本研究通过体外悬浮共培养头皮真皮祖细胞及表皮干细胞形成具有毛囊早期发育特征的真皮-表皮细胞聚集体,探究了 WNT信号通路在毛囊类器官形成过程中的作用,并通过体内实验证实其促生发能力,为实现高效培育毛囊类器官提供了新的途径。实验目的1.通过构建真皮祖细胞和表皮干细胞的三维聚集体探索体外培育毛囊类器官的实验方法。2.对成功构建的毛囊类器官进行组织学及遗传学评估。3.探究WNT信号通路在毛囊类器官形成早期发挥的作用。4.探究培育的毛囊类器官在移植后是否可以有效促进毛发生成。实验方法1.依照本课题组创立的“一... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１原代表皮细胞生长状况（１０〇ｘ）??Ａ．原代表皮细胞分离并培养２天后光镜下图；Ｂ．原代表皮细胞分离并培养７天后光镜下图??

?山东大学硕士学位论文???ａ?３?ｄａｙｓ?ｇ?１４?ｄａｙｓ??—■??图１．２?Ｐ２代表皮细胞的克隆形成??Ａ．Ｐ２代表皮细胞克隆形成实验培育３天后光镜下图：Ｂ．Ｐ２代表皮细胞克隆形成实验培育丨４天??后光镜下图；标尺＝丨〇〇?ｐｍ??１．３．流式细胞术检测发现获取的表皮细胞表达表皮干细胞表面标志物《６－??ｉｎｔｅｇｒｉｎ??表皮干细胞通常高表达ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ，因此ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ常作为表皮干细胞的标??志物。如图１．３所示，在所获得的Ｐ２代表皮细胞中，经流式细胞术分析显示９５％??以上的表皮细胞高表达ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ，空白对照组表皮细胞基本检测不到ａ６－??ｉｎｔｅｇｒｉｎ的表达。这一结果进一步证实了本实验中所分离及传代培养的表皮细胞??是表皮干细胞。??Ａ?Ｂ??Ｉ?备§１???Ｘ??Ｉ?Ｉ?！？？?Ｉ??ｉｌｒｉ?ＬＪｄ??１〇２?１〇３?ｔｏ４?１０５?１０？??ＦＩＴＣ－Ａ?ＦＩＴＣ－Ａ??图１．３流式细胞术示表皮干细胞标志物（１６－ｉｒｉｔｅｇｒｉｎ的表达??Ａ．空白对照组中ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ阳性表皮细胞的比例；Ｂ／矣验组中ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ阳性表皮细胞的比??例??２．头皮真皮祖细胞的鉴定??２．１．真皮祖细胞的培养??如图１．４所示，取不同来源的Ｐ３代真皮祖细胞复苏并培养３天后可见真皮袓??１１??

?山东大学硕士学位论文???ａ?３?ｄａｙｓ?ｇ?１４?ｄａｙｓ??—■??图１．２?Ｐ２代表皮细胞的克隆形成??Ａ．Ｐ２代表皮细胞克隆形成实验培育３天后光镜下图：Ｂ．Ｐ２代表皮细胞克隆形成实验培育丨４天??后光镜下图；标尺＝丨〇〇?ｐｍ??１．３．流式细胞术检测发现获取的表皮细胞表达表皮干细胞表面标志物《６－??ｉｎｔｅｇｒｉｎ??表皮干细胞通常高表达ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ，因此ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ常作为表皮干细胞的标??志物。如图１．３所示，在所获得的Ｐ２代表皮细胞中，经流式细胞术分析显示９５％??以上的表皮细胞高表达ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ，空白对照组表皮细胞基本检测不到ａ６－??ｉｎｔｅｇｒｉｎ的表达。这一结果进一步证实了本实验中所分离及传代培养的表皮细胞??是表皮干细胞。??Ａ?Ｂ??Ｉ?备§１???Ｘ??Ｉ?Ｉ?！？？?Ｉ??ｉｌｒｉ?ＬＪｄ??１〇２?１〇３?ｔｏ４?１０５?１０？??ＦＩＴＣ－Ａ?ＦＩＴＣ－Ａ??图１．３流式细胞术示表皮干细胞标志物（１６－ｉｒｉｔｅｇｒｉｎ的表达??Ａ．空白对照组中ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ阳性表皮细胞的比例；Ｂ／矣验组中ａ６－ｉｎｔｅｇｒｉｎ阳性表皮细胞的比??例??２．头皮真皮祖细胞的鉴定??２．１．真皮祖细胞的培养??如图１．４所示，取不同来源的Ｐ３代真皮祖细胞复苏并培养３天后可见真皮袓??１１??


本文编号：3455514