应用Orbitrap Fusion Tribrid高分辨质谱仪无创性鉴定中国健康人群的皮肤蛋白

发布时间：2021-11-04 08:18

　　研究背景近年来,随着分子生物学、生物化学、分子遗传学等学科的迅猛发展,使得包括皮肤在内等相关生理系统在细胞及分子水平上的研究日新月异。皮肤蛋白是皮肤中的主要组成部分,在皮肤屏障中发挥着保湿、信号转导、免疫调节等重要功能。皮肤蛋白含量的变化可导致皮肤屏障功能受损,后者与一些皮肤疾病的发生发展密切相关。现在迅速崛起的质谱技术也使得大规模、系统性研究蛋白质组学成为可能。皮肤蛋白的深入探索可为新药的研发及皮肤疾患的诊疗提供新的靶点和方向,因此有关皮肤蛋白的功能与作用机制逐渐成为研究热点。研究目的本研究通过使用无创性取材方法采集中国健康人群皮肤样品,然后与无标记纳流液相色谱-质谱（nLC-MS）相结合对皮肤中的蛋白进行分析,为进一步建立中国健康人群皮肤蛋白定性及定量分析平台奠定基础。实验材料与方法用医用胶带在中国健康志愿者的前臂掌侧皮肤同一部位连续5次取材,随后对胶带上的蛋白质进行收集、提取、酶解,并通过与Orbitrap Fusion Tribrid高分辨质谱仪相偶联、对已被胰蛋白酶降解过的肽混合物进行上机分析。最后使用Proteome Discoverer 2.2（Thermo）对样品中的蛋... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

OrbitrapFusionTribrid质谱仪Fig1.OrbitrapFusionTribridhigh-resolutionmassspectrometer

图 2. 创新的三合一结构Fig 2. Innovative three-in-one structure3.3.1 四极杆质量分析器：金属钼双曲面四极杆，分辨率高达 0.4Da3.3.2 双压线性离子阱：双压线性离子阱的高压阱能够将离子捕获同时提高碎裂能力，缩短碎裂时间；量范围 m/z：标准模式 50-2000m/z；高质量模式 200-4000 m/z；压线性离子阱扫描速度：20Hz；敏度（ESI）：100 fg 利血平，全扫描 MS/MS，信噪比>100:1（峰灵敏度（ESI）：100 fg 利血平，全扫描 MS3，信噪比>25:1；有自动增益控制，能全自动优化进入离子阱的离子数量并达到最佳

图 3. 样品 4 中肽段母离子所对应的 m/z 值Fig 3. The m/z value corresponding to the parent peptide of the peptide in sample 4RT: 0.00 - 120.015101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance62.7316.7815.6617.57112.8961.4897.1644.7730.6428.0219.4590.89109.2235.3847.3123.6637.3453.97 80.4680.9553.72106.8040.7355.8182.09 105.4253.2972.9666.8950.8274.34114.66116.7414.4293.9714.2685.7713.985.236.9112.85NL:2.45E10TIC MSHela02_20171223


本文编号：3475359