miR-195靶向MYB激活PI3K-Akt通路调控皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移

发布时间：2021-11-12 23:19

　　目的:探讨微小RNA 195（miR-195）对皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移的影响及其机制。方法:通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-195和MYB基因在皮肤鳞癌细胞（A431细胞）和人正常皮肤细胞（HaCaT细胞）中的表达。CCK-8实验检测过表达及下调miR-195对A431细胞增殖能力的影响;Western blot检测过表达及下调miR-195对A431细胞凋亡相关蛋白Bcl-2相关蛋白X（Bax）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）表达的影响;Western blot分析过表达及下调miR-195对A431细胞上皮细胞-间充质转化（EMT）的影响。TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-195和MYB之间的关系,分析下调MYB对A431细胞增殖和EMT的影响。Western blot检测过表达MYB后对PI3K-Akt通路的影响。LY294002作用细胞后,检测过表达MYB对A431细胞增殖和EMT的影响。结果:与HaCaT细胞相比,A431细胞中miR-195表达明显下调（P<0.01）,MYB表达明显上调（P<0.01）。过表达miR... 

【文章来源】：皮肤性病诊疗学杂志. 2020,27(06)

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

过表达miR-195抑制A431细胞增殖和EMT

结果显示,与对照组或pcDNA-3.1(+)组相比,pcDNA-MYB组细胞内MYB表达量明显升高(t值分别为16.12、17.48,P值均<0.01),说明pcDNA-MYB质粒在细胞内表达成功;与pcDNA-3.1(+)组相比,pcDNA-MYB组细胞内PI3K、Akt蛋白磷酸化水平明显升高,p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明显升高(t值分别为18.76、13.26,P值均<0.01);细胞增殖能力明显升高(t=10.77,P=0.009),Bax蛋白表达量明显降低(t=12.74,P=0.006),Bcl-2蛋白表达量明显升高(t=12.72,P=0.006),E-cadherin蛋白表达量明显降低(t=16.54,P=0.004),N-cadherin蛋白表达量明显升高(t=14.64,P=0.005)。LY294002作用细胞后,pcDNA-MYB+LY294002组与对照组相比,细胞PI3K蛋白磷酸化水平明显受到抑制(t=21.06,P=0.002);与pcDNA-MYB组相比,细胞增殖能力明显降低(t=13.94,P=0.007),Bax蛋白表达量明显升高(t=15.62,P=0.004),Bcl-2蛋白表达量明显降低(t=13.63,P=0.004),E-cadherin蛋白表达量明显升高(t=13.87,P=0.003),N-cadherin蛋白表达量明显降低(t=13.19,P=0.006),详见图5A～5J。表明过表达MYB能够激活细胞内PI3K-Akt通路,从而促进A431细胞的增殖和EMT。图3 miR-195与MYB的靶向和调控关系

miR-195与MYB的靶向和调控关系

【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-195靶向调控CHEK1对非小细胞肺癌细胞增殖、转移及侵袭的作用[J]. 罗雷,杨彦辉,李季,王毅,李晓亮,谢晓阳.  局解手术学杂志. 2019(04)
[2]518例恶性皮肤肿瘤及癌前病变的回顾性分析[J]. 刘子莲,张倩,吴雯婷,张春雷,马川.  首都医科大学学报. 2018(04)
[3]多学科护理对一例肛周鳞状细胞癌难愈性伤口的护理[J]. 方健.  实用临床护理学电子杂志. 2018(04)
[4]血清miR-195在乳腺癌诊断中的作用[J]. 朱岩,王恩礼,李晖,钟春嫦,刘佳南,段桂开.  热带医学杂志. 2013(07)



本文编号：3491835