Genistein对Livin基因表达和恶性黑素瘤LiBr细胞凋亡、周期及增殖影响的实验研究

发布时间：2021-11-14 21:01

　　目的阐明Genistein对恶性黑素瘤LiBr细胞Livin基因表达的影响和对恶性黑素瘤细胞凋亡、周期及增殖的作用，为进一步探索Genistein治疗恶性黑素瘤的可能性和揭示Genistein的抑癌机制提供实验依据。方法分别在基因和蛋白水平上应用RT-PCR和Western blot检测、确认恶性黑素瘤LiBr细胞Livin基因的表达；在体外以高表达Livin基因的恶性黑素瘤LiBr细胞为试验对象，应用RT-PCR检测Genistein作用LiBr细胞后Livin基因的表达变化，并初步探讨其剂量及时间效应；取最适浓度的Genistein作用LiBr细胞后应用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响；应用PI单染流式细胞术分析其对细胞周期的改变；应用Western blot检测其对凋亡效应蛋白caspase-3表达的影响及应用MTT比色法检测其对细胞增殖的作用。结果经RT-PCR和Western blot检测，恶性黑素瘤LiBr细胞高表达Livin基因；Genistein作用LiBr细胞后能显著下调Livin基因表达，并且下调过程呈剂量和时间依赖关系，40u... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
材料与方法
    1 研究对象
    2 主要实验仪器
    3 主要实验试剂
    4 实验方法
        4.1 细胞培养
        4.2 RT-PCR 检测 LiBr 细胞 Livin 的表达
        4.3 Western blot 检测、确认恶性黑素瘤 LiBr 细胞 Livin 的表达
        4.4 Genistein 下调 Livin 基因的剂量效应
        4.5 Genistein 下调 Livin 基因的时间效应
        4.6 Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡率
        4.7 Western blot 检测 Genistein 引起 LiBr 细胞 caspase-3 蛋白表达变化的影响
        4.8 PI 单染流式细胞仪检测细胞周期
        4.9 MTT 检测 LiBr 细胞的增殖
    5 质量控制
    6 数据处理
结果
讨论
结论
参考文献
文献综述 1
    参考文献
文献综述 2
    参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]恶性黑素瘤研究进展[J]. 郝慧霞,莎娜.  医学综述. 2010(12)
[2]Livin基因在恶性肿瘤诊断和治疗中的研究进展[J]. 周涛琪,张幸平.  实用肿瘤杂志. 2010(02)
[3]三羟异黄酮对肝癌细胞HepG2的ADAM17表达的调节[J]. 刘永存,王作仁,周爱萍,李锋.  现代肿瘤医学. 2009(09)
[4]凋亡抑制蛋白Livin在喉癌中的表达和意义[J]. 张建中,巴云鹏,吕明栓.  中国耳鼻咽喉头颈外科. 2008(10)
[5]RNA干扰沉默Livin基因表达对食管癌裸鼠移植瘤的抑制作用[J]. 王春丽,何婷玉,冯龙,马云云,郭文涛,赵国强.  肿瘤基础与临床. 2008(05)
[6]非小细胞肺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达及意义[J]. 高杨,夏庆安,吴瑜,周立君,任淑华.  山东医药. 2008(24)
[7]凋亡抑制蛋白Livin与肿瘤靶向治疗[J]. 王莉娜,李莉,张彦兵,曹博淦,肖菊香.  陕西医学杂志. 2008(05)
[8]FHIT,Livin,Smac在口腔鳞癌中的表达及意义[J]. 陈冰,孙雷,王波.  口腔医学研究. 2008(02)
[9]livin基因在胃癌中的表达研究[J]. 汪志兵,张振玉,罗新华,王劲松.  现代肿瘤医学. 2008(04)
[10]恶性黑素瘤最新动态(二)[J]. 李荟元.  中国美容医学. 2008(02)



本文编号：3495334