592nm和630nm低强度激光对人皮肤成纤维细胞的刺激效应

发布时间：2022-01-19 16:27

　　目的：利用激光的生物刺激效应研究低强度592 nm和630 nm激光对成年人及老年人皮肤成纤维细胞的增殖活性的作用,以及对前胶原基因和细胞内信号转导分子SMAD基因表达的影响,为低强度592 nm和630 nm激光用于改善皮肤老化提供细胞学依据和可供参考的治疗参数。方法：1.用体外培养的成年人和老年人真皮成纤维细胞作为细胞模型,分别以波长592 nm和630 nm的连续激光对细胞进行照射,照射功率为10 mw和30mw,功率密度为3.5mw/cm2和10.6mw/cm2,分别非重叠照射2 min、5 min和10 min,连续照射3 d,用于检测细胞增殖活性；功率密度为3.5 mw/cm2和10.6mw/cm2,分别非重叠照射5min和10min,连续照射3 d,用于检测前胶原基因和SMADs mRNA表达。2.激光照射前以及每次照射后24 h,用相差显微镜对细胞照相,比较细胞形态、数量的变化。3.用MTT比色法检测细胞增殖活性。4.应用RT-PCR技术检测细胞前胶原Ⅰ型α1、Ⅰ型α2、Ⅲα1以及SMADs mRNA的表达,用Bandscan5.0凝胶成像系统分析软件测定PCR产物电泳... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

孔培养板接种示意图

天津医科大学硕士学位论文第三章结果3.1细胞形态学观察由于%孔培养板的底部凹凸不平，相差显微镜不能清晰成像，故细胞形态学照片以6孔板为例，首先在显微镜下观察细胞分布情况，从各实验孔和对照孔选择细胞数目和分布相似的区域，在外盖上对应的位置做标记，从种植后24h，到照射实验结束后的24h，用100X相差显微镜连续四天在同一时间对各做标记的位置照相，以630Inn激光照射细胞为例，结果如下:

图14高功率密度(l0.6mw/。扩)组照射后60h3.2MTT法检测激光对皮肤成纤维细胞增殖活性的影响原理:四哇盐比色法试验是一种检测细胞存活和生长的方法。实验所用的显色剂四哇盐是一种能接受氢原子的染料，化学名为3一(4，5一二甲基唆哇一2)一2，5一二苯基四氮哇澳盐，商品名是唆哇盐，简称为MTT。活细胞线粒体中的玻拍酸脱氢酶能使外源性的M竹还原为难溶性的蓝紫色结晶物少ormaZan)，并沉积在细胞中，而死细胞则无此功能。二甲基亚矾价MsO)能够溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联免疫检测仪在550一600Inn波长处测定光吸收度可间接反映细胞增殖活性。在一定细胞数目范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。将每个实验孔的吸光度值连续测量三次，分别取平均值，数据用SPSSI1.5

【参考文献】：
期刊论文
[1]波长585nm脉冲染料激光对成纤维细胞增殖以及其前胶原基因mRNA表达的影响[J]. 虞海燕,方青,陈大方,程浩.  浙江大学学报(农业与生命科学版). 2005(06)
[2]低强度He-Ne激光照射对小鼠皮肤成纤维细胞、胸腺细胞和骨髓细胞的影响[J]. 李栋,王元秀,矫强,王军,刘月辉,张桂香.  中国激光医学杂志. 2005(04)
[3]体外培养不同代次人皮肤成纤维细胞超微结构的研究[J]. 蔡霞,高学军,张鹏,唐胜建,鞠晓燕.  解剖科学进展. 2005(03)
[4]胚胎无瘢痕愈合的调控机制研究:（I）成纤维细胞形态和生长动力学研究[J]. 郭爱华,柳大烈.  现代康复. 2001(24)
[5]皮肤衰老病理学及其防治方法[J]. 梁刘萍.  中华医学美容杂志. 1998(01)
[6]衰老皮肤表皮细胞和成纤维细胞生长动力学研究[J]. 张余光,王炜,司徒朴,李志海,祁佐良,张涤生.  中华医学美容杂志. 1997(01)



本文编号：3597186