SV40T抗原基因诱导可逆性永生化黑素细胞的生物学特征评价

发布时间：2022-02-14 22:37

　　正常细胞在体外培养时生命期是有限的,细胞增殖一段时间后会出现群体生长缓慢,有丝分裂停滞,进而衰老死亡,这种现象叫做复制衰亡（replicative senescence）。细胞的这种生物学现象导致一些体外培养的细胞因生长增殖能力衰竭、数量不足而不能充分满足实验研究和临床应用的要求。后来人们观察到一些肿瘤细胞具有持续生长和增殖的能力,可长期传代,即细胞的永生化（immortalization）。进一步研究发现部分永生化的肿瘤细胞中含有病毒基因（virus gene）,因此通过转染技术将病毒基因导入并整合在体外培养的正常细胞基因组上,使其出现永生化就成为了细胞实验研究的热门。猿猴病毒40（simian virus 40,SV40）是60年代初发现和分离的猴肾细胞病毒,人是其自然宿主。SV40的基因组能编码T（Large T）和t（small t）抗原。T抗原具有ATP酶和DNA解旋酶活性,使蛋白质丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化、ADP核糖基化和己酰基化。T抗原还有活化宿主细胞核糖体基因、诱导DNA合成、修饰蛋白质合成起始因子等作用。t抗原能反式激活RNA多聚酶基因的启动子,以及c-myc和c-f... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

质粒结构示意图图

结 果T-LoxP-PEGFP-N1质粒的扩增和鉴定粒的细菌在选择性 LB 琼脂平板上形成数百个克隆，阴随机挑选阳性克隆，提取质粒在 BamH I、EcoR I 双酶 大小条带，分别与载体和目的条带大小一致。而单酶切 1-2)；

SV40T-LoxP-PEGFP-N1质粒酶切鉴定M1:D2000DNAMarker1:未酶切质粒DNA100

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3625393