miR-146a对人黑色素瘤A375细胞增殖和侵袭的影响及作用机制
发布时间:2023-02-27 18:01
目的探讨微小RNA-146a (miR-146a)对人黑色素瘤A375细胞增殖与侵袭能力的影响及可能机制。方法利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-146a模拟物或抑制剂转染入黑色素瘤A375细胞,使miR-146a过表达或低表达,采用MTT检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化。根据生物信息学软件预测FBXL10为miR-146a的下游靶基因,双荧光素酶报告分析进行验证。分别采用实时qPCR与Western blotting检测转染后各组A375细胞FBXL10 mRNA与蛋白的表达水平。结果与对照组比较,miR-146a模拟物能够显著抑制A375细胞增殖和侵袭能力(均P <0.05)。双荧光素酶报告分析结果显示,FBXL10为miR-146a的下游靶基因,miR-146a过表达可显著降低FBXL10蛋白与mRNA的表达水平;miR-146a抑制剂的作用则与之相反。结论 miR-146a过表达能够抑制A375细胞增殖和侵袭能力,其作用机制可能与降低FBXL10表达相关。
【文章页数】:4 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 主要试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 细胞转染及分组:
1.2.2 MTT实验:
1.2.3 Transwell侵袭实验:
1.2.4 生物信息学预测与荧光素酶报告分析:
1.2.5 实时q PCR实验:
1.2.6 Western blotting检测:
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 转染效率检测结果
2.2 MTT检测结果
2.3 Transwell侵袭实验结果
2.4 荧光素酶报告分析结果
2.5 实时q PCR检测结果
2.6 Western blotting检测结果
3 讨论
本文编号:3751190
【文章页数】:4 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 主要试剂和仪器
1.2 方法
1.2.1 细胞转染及分组:
1.2.2 MTT实验:
1.2.3 Transwell侵袭实验:
1.2.4 生物信息学预测与荧光素酶报告分析:
1.2.5 实时q PCR实验:
1.2.6 Western blotting检测:
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 转染效率检测结果
2.2 MTT检测结果
2.3 Transwell侵袭实验结果
2.4 荧光素酶报告分析结果
2.5 实时q PCR检测结果
2.6 Western blotting检测结果
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