ATP-柠檬酸裂解酶在黑素瘤维罗非尼治疗抵抗中的作用机制研究

发布时间：2023-04-02 13:53

　　目的:探讨ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACLY)在黑素瘤维罗非尼治疗抵抗中的作用及其可能机制。方法:通过Western blot实验检测5μM维罗非尼处理前后黑素瘤细胞中ACLY的表达水平,采用shRNA干涉黑素瘤细胞中ACLY的表达后再给予5μM维罗非尼处理,通过流式细胞术检测细胞凋亡水平;通过Western blot实验检测黑素瘤特异性转录因子MITF的表达水平,以及抗凋亡蛋白BCL-2和促凋亡蛋白BAX的表达水平。结果:1)维罗非尼处理后黑素瘤细胞ACLY的表达水平较处理前明显升高;2)沉默ACLY可以显著增加维罗非尼处理后黑素瘤细胞的凋亡水平;3)在维罗非尼处理下,沉默ACLY可以导致MITF和BCL-2表达水平较对照组显著降低,BAX表达水平升高。结论:ACLY表达水平升高参与了黑素瘤维罗非尼治疗抵抗,可能与其调控MITF表达的作用有关。

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【文章目录】：
前言
1 材料和方法
    1.1 主要细胞、试剂和仪器
        1.1.1 黑素瘤细胞系
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 实验仪器
    1.2 实验方法和步骤
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 分组与药物处理
        1.2.3 Western blot实验
        1.2.4 ShRNA转染
        1.2.5 流式细胞凋亡检测
    1.3 统计方法
2 结果
    2.1 维罗非尼处理可促进黑素瘤细胞ACLY表达水平升高
    2.2 ACLY沉默效率验证
    2.3 沉默ACLY可以显著增加维罗非尼诱导的黑素瘤细胞凋亡水平
    2.4 在维罗非尼处理下沉默ACLY导致MITF和BCL-2表达水平降低，BAX表达水平升高
3 讨论



本文编号：3779341