沉默p21活化激酶1表达对人黑素瘤A375细胞凋亡及侵袭能力的影响

发布时间：2023-04-28 00:28

　　目的探讨shRNA沉默p21活化激酶1(p21-activated kinase 1, PAK1)基因表达对人黑素瘤A375细胞凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法对数生长期人黑素瘤A375细胞随机分为转染组(转染PAK1特异性shRNA)、阴性对照组(转染NC-shRNA)、空白对照组(不进行转染)。转染后培养72 h,采用实时荧光定量PCR法检测A375细胞PAK1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测A375细胞PAK1及p-PAK1蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果转染后培养72 h,转染组PAK1 mRNA相对表达量(0.45±0.07)、PAK1蛋白相对表达量(0.53±0.01)、p-PAK1蛋白相对表达量(0.21±0.03)均低于阴性对照组(0.98±0.04、0.65±0.02、0.38±0.04)、空白对照组(1.00±0.08、0.67±0.51、0.36±0.02)(P<0.05),细胞凋亡率[(11.20±0.21)%]高于阴性对照组[(5.86±0.51)%]、空白对...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 一般材料
    1.2 方法
        1.2.1 A375细胞复苏与培养
        1.2.2 细胞分组及转染
        1.2.3 实时荧光定量PCR法检测PAK1 mRNA相对表达量
        1.2.4 Western blot法检测PAK1蛋白及p-PAK1蛋白相对表达量
        1.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.6 Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力
    1.3 统计学处理
2 结 果
    2.1 A375细胞转染效率
    2.2 3组PAK1 mRNA及PAK1、p-PAK1蛋白相对表达量比较
    2.3 3组细胞凋亡率比较
    2.4 3组细胞迁移、侵袭能力比较
3 讨 论



本文编号：3803377