Ezrin蛋白在皮肤癌组织中的表达及生物学功能

发布时间：2023-05-08 00:51

　　目的:探讨细胞膜和细胞骨架之间的连接蛋白Ezrin在皮肤癌中的表达,明确Ezrin蛋白对人表皮癌A431生长和运动能力的影响,考察黄芩素通过Ezrin蛋白的对A431细胞生长的影响。 方法: 1、为明确Ezrin蛋白在皮肤癌组织中的表达,采用免疫组化法检测36例鳞状细胞癌(Squamous Cell Carcinoma,SCC)、27例基底细胞癌(Basal cell carcinoma,BCC)和20例脂溢性角化病(SeborrheicKeratosis,SK)、10例正常人皮肤(normal skin,NS)中Ezrin及phos-Ezrin蛋白表达水平。 2、为探讨Ezrin蛋白在癌变中的生物学作用,选取人表皮癌A431细胞作为研究材料,先运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析黄芩素(Baicalein,BAI)对A431细胞生长的影响,选用BAI细胞无毒性浓度(non-cytotoxic concentration,NCC)进行实验;免疫印迹(Western-blotting,WB)分析A431细胞中Ezrin和phos-Ezrin的表达;扫描电镜观察BAI对A431细胞伪足形成,...

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【学位级别】：硕士

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目录
英文缩写及中英文对照表
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 主要实验材料
        2.1.1 组织切片
        2.1.2 细胞株
        2.1.3 药物
        2.1.4 主要试剂
        2.1.5 主要仪器设备
        2.1.6 试剂配制
            2.1.6.1 PBS液
            2.1.6.2 MTT液
            2.1.6.3 蛋白裂解液
            2.1.6.4 4%多聚甲醛固定液
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验技术路线
            2.2.1.1 技术路线一
            2.2.1.2 实验路线二
        2.2.2 免疫组化法检测人表皮癌组织中Ezrin表达
        2.2.3 细胞培养
        2.2.4 细胞计数
        2.2.5 四甲基偶氮唑蓝(MTT)
            2.2.5.1 实验分组
            2.2.5.2 实验步骤
        2.2.6 Western-bloting
            2.2.6.1 细胞总蛋白的抽提及蛋白质浓度的测定
            2.2.6.2 Western-blotting分析
        2.2.7 划痕实验和电镜
            2.2.7.1 划痕实验测定A431细胞迁移能力
            2.2.7.2 电镜测定A431细胞伪足变化
    2.3 统计学处理
第三章 结果
    3.1 Ezrin,phos-Ezrin皮肤癌组织中表达及差异
        3.1.1 Ezrin,phos-Ezrin在NS,SK,BCC,SCC表达差异的比较
            3.1.1.1 Ezrin在NS,SK,BCC,SCC表达差异的比较
            3.1.1.2 Phos-Ezrin在NS,SK,BCC,SCC表达差异的比较
        3.1.2 Ezrin,phos-Ezrin在SCC分级及转移病理组织中的表达
            3.1.2.1 Ezrin,phos-Ezrin在SCC分级病病理组织表达差异的比较
            3.1.2.2 Ezrin,pho-Ezrin在SCC转移病理组织中表达差异的比较
    3.2 四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验结果
    3.3 Western-bloting实验结果
    3.4 划痕实验结果
    3.5 电镜实验结果
第四章 讨论
    4.1 Ezrin,phos-Ezrin在皮肤癌组织中的表达及意义
    4.2 BAI对人表皮癌A431细胞株Ezrin,phos-Ezrin蛋白表达及细胞运动能力的影响
第五章 结论
参考文献
综述
致谢
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文



本文编号：3811658