DC/B16融合细胞诱导T细胞特异性CTL的基础实验研究

发布时间：2023-05-19 23:24

　　目的 探讨B16恶性黑色素瘤细胞与C57BL/6小鼠骨髓源树突状细胞融合后体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）及对B16恶性黑色素瘤细胞的杀伤作用。 方法 用聚乙二醇（PEG）将B16恶性黑色素瘤细胞与小鼠骨髓源树突状细胞（DC）融合，融合成功后以DC细胞、B16恶性黑色素瘤细胞做为对照组，DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞作为实验组，绘制融合细胞生长曲线并进行融合细胞刺激自体T淋巴细胞增殖试验。以DC细胞、B16恶性黑色素瘤细胞、DC+B16恶性黑色素瘤细胞联合培养做为对照组，DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞作为实验组，用细胞内细胞素染色法检测DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞诱导CTL的活性，体外检测DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞融合细胞诱导产生的CTL对B16恶性黑色素瘤的杀伤性作用。实验数据用x±S进行计数，使用SPSS13.0软件，选择one-wayANOVA和LSD’s post hoc test统计学方法对所得数据进行统计学分析。 结果 小鼠骨髓源树突状细胞（DC）与B16恶性黑色素瘤细胞成功实现融合，给予合适的完全培养基和生长环境后，发现DC/B16恶性黑色素瘤融合...

【文章页数】：41 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
前言
材料和方法
    一、实验材料
        （一）实验细胞
        （二）药品及试剂
        （三）仪器及设备
        （四）培养基及缓冲液的配置
    二、试验方法
        （一） 树突状细胞（DC）的提取及培养
        （二） T 淋巴细胞的提取及培养
        （三）B16 恶性黑色素瘤细胞的培养：传代、冻存和复苏
        （四）DC/B16 恶性黑色素瘤融合细胞的制备
        （五）HAT 培养选择法筛选 DC/B16 恶性黑色素瘤融合细胞
        （六）形态学观察 DC/B16 恶性黑色素瘤融合细胞和绘制生长曲线
        （七）DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞刺激自体T细胞增殖实验
        （八）DC/B16融合细胞体外诱导T细胞分泌IFN-γ含量测定
        (九） 融合细胞体外抗肿瘤活性分析
    三、 统计学分析
结果
    一、形态学观察 DC 细胞、T 淋巴细胞、恶性黑色素瘤细胞和融合细胞
    二、绘制融合细胞生长曲线
    三、DC/B16恶性黑色素瘤融合细胞刺激自体T细胞增殖实验
    四、DC/B16 恶性黑色素瘤融合细胞体外诱导 T 细胞分泌 IFN-γ含量测定
    五、融合细胞体外抗肿瘤活性分析
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3820091