抗菌肽LL-37对中波紫外线辐射人角质形成细胞核因子-κB的影响

发布时间：2017-05-20 18:10

本文关键词：抗菌肽LL-37对中波紫外线辐射人角质形成细胞核因子-κB的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景：紫外线（ultraviolet, UV）是影响人皮肤的重要外界环境因素之一，特别是中波紫外线(ultraviolet B, UVB)。UVB辐射能使皮肤发生一系列的分子事件，包括人体唯一的cathelicidin家族抗菌肽LL-37的产生和重要的细胞转录因子核因子-κB（nuclear factor-κB, NF-κB)的激活。Mookherjee等的研究表明LL-37能显著抑制脂多糖（lipopolysaccharides, LPS）诱导人单核细胞（human monocytic cells, THP-1）的NF-κB活化。LL-37是否影响UVB辐射诱导的人角质形成细胞（keratinocyte，KC）NF-κB的活化，目前国内外尚没有关于这方面的研究。目的：探讨抗菌肽LL-37对UVB辐射KC NF-κB的蛋白表达及转录活性的影响，为UVB辐射对人皮肤免疫系统的影响提供一些启示及皮肤科临床医生运用UVB治疗皮肤病及诊治日光性皮肤病提供参考。方法：120mJ/cm~2剂量UVB辐射培养的人永生化角质形成细胞株（immortalizedhuman keratinocyte cell line, HaCaT）和原代人角质形成细胞（normal humankeratinocyte, NHK），，加入不同浓度的LL-37（终浓度为0,0.5,2,5,10,20ug/mL）共同培养4h,应用免疫印迹（western blotting）和电泳迁移率实验（electrophoreticmotility shift assay, EMSA）方法，检测HaCaT和NHK细胞各实验组NF-κB的蛋白表达和转录活性。结果：(1) HaCaT和NHK细胞UVB辐射组NF-κB p65总蛋白表达较未作UVB辐射的空白对照组有大幅增高，具有统计学意义（P0.001）。HaCaT和NHK细胞UVB辐射+不同浓度LL-37处理组NF-κB p65总蛋白表达均明显低于相应的UVB辐射组，具有统计学意义，且具有剂量依赖性，其中HaCaT细胞UVB辐射+0.5μg/mL LL-37处理组P0.05，其他实验组P0.001。(2) HaCaT和NHK细胞UVB辐射组NF-κB的转录活性较未作UVB辐射的空白对照组有大幅增高，具有统计学意义（HaCaT细胞UVB辐射组P0.05，NHK细胞UVB辐射组P0.001）。HaCaT和NHK细胞UVB辐射+不同浓度LL-37处理组NF-κB的转录活性均低于相应的UVB辐射组，具有剂量依赖性，其中HaCaT细胞UVB辐射+2,5,10μg/mL LL-37处理组P0.05，UVB辐射+20μg/mL LL-37处理组P0.001，UVB辐射+0.5μg/mLLL-37处理组不具有统计学意义，NHK细胞UVB辐射+10μg/mL LL-37处理组P0.05，UVB辐射+20μg/mL LL-37处理组P0.001，其他实验组不具有统计学意义。结论：LL-37可抑制UVB辐射诱导的HaCaT和NHK细胞NF-κB的蛋白表达和转录活性的增加，且这种抑制具有剂量依赖性。
【关键词】：抗菌肽LL-37 核因子-κB 中波紫外线 角质形成细胞 HaCaT细胞
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R758.13
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