DANCR通过激活YAP促进黑素瘤细胞侵袭并与不良预后的相关性

发布时间：2023-06-03 08:23

　　目的根据本院收集的黑素瘤组织标本分析长链非编码RNA DANCR(long non-coding RNA differentiation antagonizing non-protein coding RNA,LncRNA DANCR)与黑素瘤临床预后关系。阐明DANCR在黑素瘤侵袭中所扮演的角色。方法用激光捕获法获取黑素瘤组织标本以分析DANCR表达量与黑素瘤患者临床进展的关系;用A375和B16细胞株行体外实验,以慢病毒为载体在细胞中敲低DANCR。基质胶覆盖的上层小室用于Transwell模型检测细胞侵袭能力;通过Western blot实验和ELISA检测MMP2、MMP9在细胞中表达水平和细胞外分泌水平。通过Western blot实验检测p-YAP和YAP表达以明确其活性;用XMU-MP-1和Verteporfin(VP)分别在黑素瘤细胞株中激活和抑制YAP活性。结果临床数据分析可得,DANCR表达量与临床M分期和病理N分期、Breslow深度和Clark值均密切相关。在A375和B16细胞中敲低DANCR可抑制细胞侵袭,并下调MMP2、MMP9表达和细胞外分泌(P<...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养和RNA稳定干扰细胞系建立
        1.2.2 Western blot检测
        1.2.3 细胞总RNA提取、反转录和qRT-PCR检测
        1.2.4 细胞侵袭分析
        1.2.5 激光捕获微检测
        1.2.6 移植瘤模型和体内转移分析
        1.2.7 统计学处理
2 结果
    2.1 用激光捕获获取患者黑素瘤瘤体组织,检测DANCR表达
    2.2 敲低DANCR可抑制黑素瘤细胞侵袭
    2.3 敲低DANCR下调YAP,而激活YAP促进黑素瘤细胞侵袭
    2.4 DANCR通过激活YAP调控黑素瘤细胞侵袭
3 讨论



本文编号：3828981