恶性黑素瘤细胞miR-508-3p与叉头框转录因子C1的关系及对增殖、迁移和侵袭的影响

发布时间：2024-02-24 10:08

　　目的探讨mi R-508-3p与叉头框转录因子C1(forkhead box C1,FOXC1)的关系及其在恶性黑素瘤中的表达和作用机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测mi R-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素细胞及A375恶性黑素瘤细胞中的表达;将体外培养的A375细胞分为mimics NC组、mi R-508-3p mimics组、inhibitor NC组和mi R-508-3p inhibitor组,RT-qPCR检测其沉默效果及对FOXC1 mRNA水平的影响;免疫印迹法(Western blot)分别检测FOXC1蛋白的表达量;MTT法检测A375细胞的增殖能力;Transwell实验检测转染后A375细胞侵袭及迁移能力的变化;荧光素酶报告基因技术检测FOXC1是否为mi R-508-3p的直接靶基因。结果与人正常黑素细胞相比,A375细胞中mi R-508-3p表达明显降低,而FOXC1表达明显升高;与inhibitor NC组相比,转染mi R-508-3p inhibitors的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显下调,FOX...

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【部分图文】：

图1miR-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素细胞及A375MM细胞中的表达

RT-qPCR检测结果表明，A375MM细胞中miR-508-3p的相对表达量为9.84±0.46，与HEM正常黑素细胞26.30±0.43比较，明显降低（t=48.67,P<0.001）。A375MM细胞中FOXC1的相对表达量为18.00±0.87，与HEM正常黑素细....

图2过表达/降低miR-508-3p对MMA375细胞增殖、迁移及侵袭的影响

应用Starbase生物信息学网站预测FOXC13"-UTR上存在miR-508-3p的结合位点（图4A）。荧光素酶实验结果显示：在FOXC1-W组中，与NCmimics组相比，miR-508-3pmimics组荧光素酶的活力值明显降低（t=19.60,P<0.001）。....

图3过表达/降低miR-508-3p对MMA375细胞中miR-508-3p和FOXC1表达的影响

图2过表达/降低miR-508-3p对MMA375细胞增殖、迁移及侵袭的影响3讨论

图4miR-508-3p与FOXC1的靶向关系

miRNA是一类非编码的含有20～25个核苷酸内源性小RNA，可以结合在靶基因mRNA3"端非翻译区(3"-UTR)，从而降解靶基因的mRNA，抑制蛋白的翻译。目前研究发现miRNA在MM的发生和发展过程中的作用不可忽视[8,9]。miR-508-3p属于miR-5....

本文编号：3908832