乙酰乳香酸（BC-4）抗肿瘤作用的分子机制及黑色素瘤细胞基本生物学特性的研究

发布时间：2024-05-19 22:35

　　乙酰乳香酸(BC-4)是提取自中药乳香(Boswellia carterii Birdw.)的五环三萜类成分，初期的药物筛选表明其对白血病细胞有较强的诱导分化作用，本研究对BC-4抗恶性细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化、凋亡，以及抗肿瘤侵袭转移等作用进行了研究，并进一步探讨了其发挥抗肿瘤作用的分子机理。主要结果如下： 1．BC-4抗肿瘤细胞增殖作用 研究表明，BC-4能抑制不同组织来源的恶性肿瘤细胞的生长(包括KB人上皮癌细胞、A2780人卵巢癌细胞、MCF-7人乳腺癌细胞、SHG-44人神经胶质瘤细胞、HCT-8人结肠癌细胞及A549人非小细胞肺癌细胞)，其IC₅₀从5.73μM到16.44μM。 2．BC-4诱导恶性细胞分化 2．1．白血病细胞 BC-4能诱导HL-60人早幼粒白血病细胞沿粒系方向分化，表现为NBT阳性细胞明显增加，细胞中出现中、晚幼粒细胞及杆状、分叶核各期粒细胞，但以不完全分化的中、晚幼粒细胞为主，细胞形态多分化为中幼粒细胞。BC-4以20、25μM作用于HL-60细胞6天后，NBT阳性率分别为51.5％和9...

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【学位级别】：博士

【文章目录】：
第一部分 乙酰乳香酸(BC-4)抗肿瘤作用的分子机制
    缩略词一览表
    摘要
    Abstract
    前言
    实验材料
    实验方法
    实验结果
        一.BC-4抗肿瘤恶性增殖作用
        二.BC-4对HL-60人白血病细胞的诱导分化作用
            1.形态学观察
            2.NBT还原能力
        三.BC-4对黑色素瘤细胞的诱导分化作用
            1.BC-4对B16F10小鼠黑色素瘤细胞的分化诱导作用
                1.1.BC-4对B16F10细胞生长曲线的影响
                1.2.BC-4对B16F10细胞形态的影响
                1.3.BC-4对B16F10细胞黑色素含量的影响
                1.4.BC-4对B16F10细胞运动能力的影响
                1.5.BC-4对B16F10细胞细胞周期的影响
                1.6.BC-4对B16F10细胞拓扑异构酶活性的影响
            2.BC-4对MV3人黑色素瘤细胞的分化诱导作用
                2.1.BC-4对MV3细胞生长曲线的影响
                2.2.BC-4对MV3细胞形态及黑色素含量的影响
                2.3.BC-4对MV3细胞表面抗原表达的影响
                2.4.BC-4对MV3细胞运动能力的影响
        四.BC-4对人胃癌细胞碱性磷酸酶(AKP)及乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响
            1.BC-4对BGC-803人胃癌细胞AKP及LDH活性的影响
            2.BC-4对BGC-823人胃癌细胞AKP及LDH活性的影响
        五.BC-4对T24人膀胱癌细胞的诱导凋亡作用
            1.形态学观察
            2.流式细胞仪检测
            3.DNA ladder分析
            4.分子机理研究
                4.1.Western杂交检测caspase-8酶原的降解
                4.2.RT-PCR检测Fas、TRAIL-R1、TRAIL-R2、FasL、TRAIL、c-jun及TNF mRNA的表达
                4.3.Caspase抑制剂对细胞凋亡的影响
                4.4.BC-4未引起HT-1376人膀胱癌细胞凋亡
                4.5.Western杂交检测P21／WAF1及Bcl-2表达
                4.6.PDTC及Pifithrin-α对P21／WAF1表达及细胞凋亡的影响
        六.BC-4对人乳腺癌细胞的诱导凋亡作用
            1.对MDA-MB-468、MDA／NEO、MDA／HER-2的诱导凋亡作用
            2.SKBR-3细胞对凋亡的耐受性
            3.分子机理研究
                3.1.Western杂交检测caspase-8、P21／WAF1及Bcl-2表达
                3.2.逆转录-PCR(RT-PCR)检测EGFR、c-erbB-2 mRNA的表达
        七.IFN_v对MV3人黑色素(?)细胞的凋亡增敏作用
            1.IFN_v对MV3细胞表面抗原表达的影响
            2.IFN_v对MV3细胞运动能力的影响
            3.IFN_v对MV3细胞的凋亡增敏作用
            4.BC-4对MV3人黑色素瘤细胞的作用机理研究
        八.BC-4对HT-1080人纤维肉瘤细胞的作用
            1.BC-4对HT-1080细胞Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响
            2.BC-4对HT-1080细胞的诱导凋亡作用
                2.1.形态学观察
                2.2.DNA ladder分析
                2.3.流式细胞仪检测
        九.BC-4对人脐静脉血管内皮细胞的作用
            1.BC-4对EC-304人脐静脉血管内皮细胞DNA、RNA及蛋白质合成的影响
            2.BC-4未引起原代人脐静脉血管内皮细胞凋亡
        十.BC-4对S180小鼠肉瘤、H22小鼠肝癌动物移植性肿瘤的作用
        十一.BC-4对B16BL6小鼠黑色素瘤自发性肺转移的实验治疗
            1.BC-4对B16BL6细胞粘附能力的影响
            2.BC-4对B16BL6细胞小鼠爪垫皮下生长的影响
            3.BC-4对B16BL6细胞小鼠自发性肺转移的实验性治疗
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 黑色素瘤细胞的基本生物学特性的研究
    摘要
    Abstract
    前言
    实验材料
    实验方法
    实验结果
        一、小鼠黑色素瘤细胞的侵袭性能与其基本生物学特性的相关性研究
            1.重组基底膜侵袭能力
            2.细胞运动能力
            3.黑色素含量
            4.Ⅳ型胶原酶分泌
            5.端粒酶活性
            6.相关性分析
        二、高分子量黑色素瘤相关抗原(HMW-MAA)在人黑色素瘤细胞运动中的作用
            1.HMW-MAA从单克隆抗体对MV3细胞运动的抑制作用
            2.HMW-MAA从单克隆抗体对T24人膀胱癌细胞运动的影响
            3.HMW-MAA不同表达水平的黑色素瘤细胞运动能力的比较
            4.胰酶消化对MV3细胞HMW-MAA表达及细胞运动的影响
            5.反义核苷酸对MV3细胞运动的影响
            6.HMW-MAA在MV3细胞表面分布及HMW-MAA在细胞运动过程中的循环
        三、稳定表达红色及绿色荧光蛋白的MV3细胞系的建立
            1.DsRed1基因的亚克隆
            2.细胞转染pcDNA3／DsRed1及pEGFP-N1／2／3
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 综述
    以血管生成为靶点的抗肿瘤药物研究策略及进展
个人简历
致谢
Stipendienurkunde



本文编号：3978552