BRAF基因V600E突变检测的荧光PCR方法的建立

发布时间：2017-07-27 09:26

  本文关键词：BRAF基因V600E突变检测的荧光PCR方法的建立

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【摘要】：目的:建立检测鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600E突变的荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,为黑色素瘤的药物靶向治疗提供新的基因检测方法。方法:根据BRAF基因序列V600E位点区域设计特异性的引物和探针,建立该检测方法。检测BRAF基因V600E突变的黑色素瘤临床样本、BRAF基因V600E突变质粒和正常临床样本,评价方法的准确性、灵敏度和特异性。结果:BRAF基因V600E突变的黑色素瘤临床样本在V600E检测体系中具有特异性的扩增;检测灵敏度约为101拷贝/反应;正常临床样本在V600E检测体系中没有特异性的扩增,均是V600E突变阴性。结论:建立的方法可以用于检测黑色素瘤临床样本中的BRAF基因V600E突变。
【作者单位】： 中国食品药品检定研究院;中国科学院北京基因组研究所;珍奥集团股份有限公司;
【关键词】： 黑色素瘤 鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B(BRAF) 荧光聚合酶链式反应 药物靶向治疗 基因检测
【分类号】：R739.5
【正文快照】： 鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因,是RAF基因家族成员,位于染色体7q34,包含18个外显子。1988年Ikawa等首先在人类尤文氏肉瘤中发现并将其克隆出来,首次确定其为一种癌基因[1]。BRAF基因编码的蛋白质(BRAF蛋白)是一种存在于细胞质内的丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶,是R

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本文编号：580762