皮肤光老化SD大鼠模型的构建及p38MAPK通路的组织学表达

发布时间：2017-08-09 05:16

  本文关键词：皮肤光老化SD大鼠模型的构建及p38MAPK通路的组织学表达

  更多相关文章： 光老化 动物模型 p38MAPK 热休克蛋白 免疫组化

【摘要】：目的:探索皮肤光老化Sprague-Dawley大鼠模型的构建方法,探讨该模型的评价标准。并对光老化中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的表达进行组织学检测,探讨其在光老化中的意义。方法:SD大鼠随机分为空白对照组,紫外线低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组8只。采用长波紫外线结合中波紫外线模拟日光,照射低、中、高剂量组大鼠背部皮肤,每天一次,持续10周,其中:1)低剂量组以10 min/d维持;2)中剂量组以10 min/d起始,每2周递增10 min至20 min/d,并以20 min/d维持;3)高剂量组以10 min/d起始,每2周递增10 min至30 min/d,并以30 min/d维持。观察皮肤外观,行皱纹等级评分;HE染色、Masson染色、透射电镜验证组织病理及超微结构改变;生化指标选择丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)检测氧化衰老程度。并评价各组的造模水平。取造模成功组进一步行免疫组化,检测p38MAPK、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、热休克蛋白27(Hsp27)的表达,通过图像分析系统分析其平均光密度值。结果:10周结束后,低、中、高剂量组大鼠皮肤均出现不同程度的皱纹,其中高剂量组皱纹深大、持久,皮肤明显粗糙、缺乏弹性,其老化表现能稳定维持、不易消退。组织学上高剂量组出现典型的表皮增厚、腺体增生、胶原纤维减少,超微结构下可见老化坏死细胞增多、真皮结构破坏,均较低、中剂量组显著。生化指标结果提示,低、中、高剂量组MDA含量均较对照组升高,Hyp降低,但二者仅有高剂量组与对照组存在统计学差异(P(27)0.05);SOD的活性在紫外线照射的三组中有不同程度降低,但差别与对照组均无统计学意义(P(29)0.05)。结合以上评判标准认为高剂量组为造模较成功的一组,行免疫组化,结果提示光老化组织中p38MAPK于角质形成细胞胞浆、腺体、真皮浅层纤维间阳性表达,MMP-1主要于角质形成细胞胞浆、真皮浅层纤维间及成纤维细胞胞浆阳性表达,Hsp27主要于表皮细胞内及真皮浅层阳性表达;三者平均光密度值均较对照组升高且有显著差异(P(27)0.01)。结论:高剂量组SD大鼠皮肤具备光老化的典型特征,表明利用紫外线剂量递增、维持10周的方法可更为稳定、有效地诱导光老化动物模型。在光老化中,p38MAPK通路相关因子的组织学表达增高,分析提示其在光老化发展及损伤后修复中有着重要作用。
【关键词】：光老化 动物模型 p38MAPK 热休克蛋白 免疫组化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R-332;R758.1
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 1 材料和仪器12-13
• 2 方法13-20
• 3 结果20-28
• 讨论及结论28-34
• 参考文献34-38
• 附图38-39
• 文献综述39-45
• 参考文献41-45
• 致谢45-46
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文及参与项目46

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本文编号：643669