检测单纯疱疹病毒2型的实时荧光定量聚合酶链反应方法的建立

发布时间：2017-08-10 05:09

  本文关键词：检测单纯疱疹病毒2型的实时荧光定量聚合酶链反应方法的建立

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【摘要】：目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法,检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)。方法根据基因库信息,以HSV-2的gG基因区为靶基因,设计合成引物和荧光探针。采用重组质粒构建标准品,优化反应体系进行方法学评价,同时对350例临床诊断HSV-2感染者和50例健康体检者的分泌物进行检测。结果成功建立了TaqMan技术的real-time PCR方法。通过反应体系优化重复性良好,批内变异系数CV=2.56%,批间CV=5.15%。特异性高,对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒及解脲支原体、沙眼衣原体阳性标本进行检测无特异性扩增,灵敏度达到500拷贝。从350例临床诊断HSV-2感染者的分泌物中,检出HSV-2DNA 288例,检出率82.29%;50例健康体检者分泌物中未检出HSV-2DNA。结论 real-time PCR方法能够快速、准确地检出HSV-2DNA,其特异性强、灵敏度高,可用于临床诊断HSV-2感染。
【作者单位】： 浙江省立同德医院检验科;杭州市西溪医院;
【关键词】： 实时荧光定量聚合酶链反应 生殖器疱疹 疱疹病毒型
【分类号】：R752.1;R440
【正文快照】： 生殖器疱疹(Genital herpes,GH)是由单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)感染泌尿、生殖道及肛周部位皮肤黏膜引起的一种慢性、复发性、传染性疾病,发病占性传播疾病的30%左右。而发生GH感染患者中,85%以上为HSV-2感染[1]。典型GH感染后多出现大小不等的水泡,也有相当一部

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