真皮间充质干细胞在皮肤损伤修复过程中的作用

发布时间：2017-10-06 21:26

  本文关键词：真皮间充质干细胞在皮肤损伤修复过程中的作用

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【摘要】：研究目的:研究小鼠真皮间充质干细胞(dermis-derived mesenchymal stem cells,DMSCs)在皮肤创伤修复过程中的影响;探讨表面标记物分别为DLK1+/Sca1-、DLK1-/Sca1+两种DMSCs对创伤修复造成的影响之间的区别,为进一步揭示胚胎发育过程中真皮干细胞的功能以及探讨伤口修复愈合过程中复杂的作用机制提供了新的研究方向以及实验基础。研究方法:利用胶原酶Ⅲ对小鼠胚胎的皮肤组织进行消化,通过流式细胞仪对所得细胞表面标记物进行分析。使用免疫磁珠分选技术,分选出DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+两种类型真皮间充质干细胞,对其进行培养并收集上清;使用细胞免疫荧光技术,检测DLK1+/Sca1-细胞的表面抗原,诱导DLK1+/Sca1-细胞进行成骨、成脂分化。利用紫外分光光谱仪绘制DMSCs上清的紫外吸收光谱。利用小鼠皮肤线性伤口模型以及环形切除模型观察DMSCs上清的创伤修复作用。实验结果:1.真皮来源的干细胞通过流式细胞仪检测,阳性表达CD29,阴性表达CD34。2.通过免疫磁珠分选技术分选出DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+的两种细胞后,在DLK1+/Sca1-细胞上用细胞免疫荧光技术,发现其阳性表达CD90,CD44。在促成骨、脂分化培养基的诱导下,DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+这两种均可以向成骨、脂方向分化。3.真皮间充质干细胞上清的紫外分光光谱在260nm处有吸收高峰。小鼠线性伤口模型中,上清组较对照组愈合速度加快。DLK1+/Sca1-真皮间充质干细胞上清在小鼠皮肤线性伤口模型以及小鼠皮肤环形切除模型中,都比DLK1-/Sca1+细胞上清组,空白对照组以及培养基组伤口愈合速度加快。说明真皮间充质干细胞上清促进伤口愈合的作用是基于DLK1+/Sca1-这种细胞产生的。
【关键词】：真皮间充质干细胞 伤口愈合 DLK1 Sca1 磁珠分选
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R751
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 常用缩写词中英文对照表10-11
• 前言11-13
• 第一部分 真皮间充质干细胞的提取、分选以及鉴定13-31
• 1 材料与方法13-26
• 1.1 主要材料13-19
• 1.2 实验方法19-26
• 2 结果26-29
• 2.1 真皮间充质干细胞提取，分选以及培养26-27
• 2.2 细胞免疫荧光检测DLK1+/Sca1-细胞细胞表面抗原27-28
• 2.3 真皮间充质干细胞的分化能力测定28-29
• 3 讨论29-30
• 4 结论30-31
• 第二部分 真皮间充质干细胞上清修复皮肤损伤的效果31-41
• 1 材料与方法31-35
• 1.1 主要材料31-33
• 1.2 实验方法33-35
• 2 结果35-39
• 2.1 真皮间充质干细胞上清紫外吸收光谱35
• 2.2 皮肤线性伤口模型结果35-37
• 2.3 皮肤环形伤口模型结果37-39
• 3 讨论39-40
• 4 结论40-41
• 参考文献41-45
• 综述45-52
• 参考文献49-52
• 致谢52-53
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果53-54
• 个人简历54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 史春梦,程天民;大鼠真皮多能间充质干细胞的分离培养[J];第三军医大学学报;2001年09期

2 史春梦,程天民;大鼠真皮间充质干细胞的体外长期培养及胶原海绵对其生长的影响[J];生物医学工程学杂志;2002年04期

3 胡煜;陈维信;阎影;;骨髓间充质干细胞在现代细胞治疗中的潜在作用[J];国际移植与血液净化杂志;2006年03期

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本文编号：985111