转染TDP-25对SH-SY5Y细胞自噬蛋白表达及细胞活力、凋亡的影响

发布时间：2017-10-09 16:16

  本文关键词：转染TDP-25对SH-SY5Y细胞自噬蛋白表达及细胞活力、凋亡的影响

  更多相关文章： TDP- 自噬 细胞活力 细胞凋亡

【摘要】：目的:探讨TDP-25对SH-SY5Y细胞自噬蛋白表达及细胞活力、凋亡的影响。方法:将神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y分为3组,分别转染质粒GFP-N1、GFP-TDP-43和GFP-TDP-25,24 h后应用免疫荧光法检测包涵体,Western blot法检测LC3、Beclin-1蛋白的表达情况。将SH-SY5Y细胞转染质粒GFP-TDP-25后分为2组,一组加自噬抑制剂3-MA,一组不加3-MA,MTT比色法检测细胞活力,Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果:GFP-N1组细胞胞质、胞核均见较强绿色荧光信号;GFP-TDP-43组较强的绿色荧光信号分布于胞核中,未见明显的包涵体形成;GFP-TDP-25组可见较强的绿色荧光信号颗粒状分布于胞质中,形成包涵体;3组Beclin-1表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ差异有统计学意义(F=192.700、247.420,P0.05),GFP-TDP-25组Beclin-1表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ大于GFP-TDP-43组(P0.05),后者大于GFP-N1组(P0.05)。加入3-MA后,转染GFP-TDP-25的细胞细胞活力降低,细胞凋亡率增高(t=38.595、5.920,P0.001)。结论:TDP-25可能通过上调细胞巨自噬水平减弱其对细胞的损害。调控巨自噬水平对肌萎缩性侧索硬化症和额颞叶变性患者的病情进展可能起到一定的延缓作用。
【作者单位】： 郑州大学第一附属医院神经内科;河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室;
【关键词】： TDP- 自噬 细胞活力 细胞凋亡
【基金】：郑州市科技攻关项目131PLJRC675
【分类号】：R329.2
【正文快照】： TDP-43(transactive response DNA-binding pro-组,24 h后脂质体转染法分别转染GFP-N1、GFP-tein of 43 000)是一种DNA和RNA结合蛋白,在心TDP-43和GFP-TDP-25,转染24 h后每孔用40 g/L脏、肾脏、肌肉和中枢神经系统中广泛表达[1],结构多聚甲醛固定10 min,1×PBS漂洗3遍后,应用

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 郭倩倩;刘志燕;姜丽丽;胡婷华;李东繁;刘莹;刘梦洁;梁璇;南克俊;;营养缺乏对人肺癌细胞自噬的诱导作用[J];南方医科大学学报;2014年05期

2 方立;王雪晶;荆婧;马耀华;邓文静;张雯雯;滕军放;;rhG-CSF对大鼠缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响[J];郑州大学学报(医学版);2013年06期

3 杨t熁，

本文编号：1001180