自噬在低氧促神经干细胞增殖及在脑缺血损伤中的调节作用

发布时间：2017-10-17 00:39

  本文关键词：自噬在低氧促神经干细胞增殖及在脑缺血损伤中的调节作用

  更多相关文章： 神经干细胞 自噬 Wip1 低氧 线粒体自噬 脑缺血 BNIP3 p MCAO

【摘要】：神经干细胞(Neural Stem Cell,NSC)是指具有分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞的能力,能自我更新并能生成大量脑组织细胞的细胞群。在胚胎期,神经干细胞主要分布在大脑的皮层、海马、纹状体和中脑等区域;在成年期,神经干细胞主要局限在海马齿状回SGZ、环绕侧脑室的室脑膜下层SVZ和纹状体。神经干细胞因其具有自我更新能力和分化能力,通过移植神经干细胞给治疗神经退行性疾病带来了新的希望,因而对神经干细胞的增殖和分化的研究是最近几年的热点。神经干细胞的增殖受到多方面因素的影响和调节,其中内因主要有基因、神经干细胞内蛋白、转录因子等,外因则包括神经干细胞的营养因素、细胞间相互作用、各种理化因素如低氧等。在哺乳动物中由于脑部区域的特殊构造,通常情况下在胚胎发育阶段和成年脑组织中氧含量只有3%-5%,称之为“生理性低氧”。因此,研究生理性低氧情况下神经干细胞的增殖情况具有重要的生理意义。本实验即在生理性低氧条件下开展对神经干细胞增殖特性的研究,从细胞代谢的角度阐释低氧对神经干细胞增殖的调控作用。自噬(autophagy)是溶酶体介导细胞内蛋白质和细胞器降解的正常新陈代谢过程,在维持细胞自身内环境稳定,保护细胞免受应激损伤等方面发挥着重要作用。在各种应激状态下,自噬被激活,可以清除细胞内异常折叠的蛋白质和衰老、受损的细胞器,促进细胞的存活,但如果细胞自噬被过度激活,细胞自噬压力超出细胞自身可调节的程度,也会加速细胞的死亡。在神经干细胞的低氧过程中自噬会起到什么作用还不得而知。Wip1(Wild type p53-induced phosphatase 1)是一种原癌基因,属于丝氨酸/苏氨酸家族成员的磷酸酶,因此关于Wip1的研究主要集中在识别Wipl的靶蛋白与去磷酸化位点上。到目前为止已经发现至少7种Wipl靶蛋白,包括与细胞增殖周期密切相关的p53、p38等,Wip1通过使p53、p38发生去磷酸化解除它们抑制细胞增殖的作用,从而在细胞增殖过程中发挥重要的调节作用。那么,在神经干细胞低氧过程中Wip1是否参与对细胞增殖的调控?该调控作用是否与自噬调节相关?本文将就这些问题分别进行讨论。在本研究中,我们采用3%O2低氧模型(以20%O2为常氧对照)首先探讨了低氧条件下神经干细胞中自噬的变化,及其对细胞存活的影响;然后检测了Wip1在低氧过程中的表达变化及其对细胞存活和自噬的影响,并进一步分析了Wip1与自噬在低氧条件下调节神经干细胞增殖时的关联。研究结果如下:1.低氧对神经干细胞活性的影响我们采用常氧(20%)和低氧(3%)对神经干细胞进行不同时间的处理,通过比较低氧和常氧对神经干细胞的存活和增殖的影响,以及不同氧浓度条件下神经干细胞中活性氧ROS的变化,探究低氧对神经干细胞活性的影响。1.1神经干细胞分离和培养取SD大鼠14.5天胚胎的中脑,接种于含有EGF,b FGF等因子的无血清培养基中,原代细胞经过一天的培养就可以观察到神经干细胞的增殖现象,神经干细胞悬浮在培养液中,2到3天可以观察到神经干细胞形成神经球,悬浮生长5天左右可以经消化传代。1.2神经干细胞的鉴定为了证明我们所分离培养的细胞是神经干细胞,我们取生长状态良好、大小合适的神经球,进行Nestin染色鉴定。实验结果显示,神经干细胞生长时成球状,神经球中绝大部分细胞显示Nestin染色阳性,结果证实我们培养的细胞确实为神经干细胞,且细胞纯度较高,可以进行后续的实验。1.3低氧对神经干细胞存活的影响我们用CCK-8实验比较不同氧浓度、不同低氧处理时间对神经干细胞存活能力的影响。实验结果显示,神经干细胞经过3%低氧24 h、48 h、72 h处理后存活能力显著提高,表明3%低氧能够显著促进神经干细胞的存活。1.4低氧对神经干细胞增殖的影响为了进一步探究低氧对神经干细胞增殖的影响,我们通过Brd U和HPI(Hypoxyprobe?-1 Kit)低氧探针掺入法观察了不同氧浓度下神经干细胞的增殖状态。结果显示:神经干细胞经过3%低氧处理后Brd U阳性细胞较常氧组明显增加,并且Brd U阳性细胞主要分布在神经球的外围,表明该部位是神经干细胞增殖的主要区域。1.5低氧对神经干细胞中ROS含量的影响低氧与ROS联系密切,正常含量的ROS可作为第二信使影响细胞周期,过量的ROS将会造成细胞损伤。我们进一步应用ROS荧光分子探针孵育神经干细胞,经过染色后用流式细胞仪检测分析。结果显示:与常氧对照组相比,神经干细胞经过3%低氧处理不同时间点后ROS都明显升高,48 h时增加最为显著,其含量增加了约2.5倍,低氧72 h ROS含量降低,但仍明显高于常氧对照组。1.6自噬(线粒体自噬)抑制剂Mdivi-1对神经干细胞中ROS含量的影响ROS主要是在线粒体中产生,线粒体自噬作为自噬的一种类型,我们又进一步检测了线粒体自噬抑制剂Mdivi-1处理神经干细胞24 h后神经干细胞中的ROS含量,结果显示:与常氧对照组相比,低氧组和常氧给药组ROS含量增加明显;与低氧组相比,低氧给药组ROS水平明显升高,以上结果提示3%低氧下ROS含量适度增加,抑制自噬(线粒体自噬)后神经干细胞中的ROS水平明显升高,且低氧下增加更多。2.低氧对神经干细胞自噬的影响自噬是细胞的一种代谢机制,当细胞中ROS水平过高时会激发自噬来保护细胞免受过量ROS带来的伤害。为阐明低氧下神经干细胞的自噬水平及其与ROS和细胞存活的关系,我们分别进行了以下实验:2.1低氧条件下神经干细胞自噬水平的变化将神经干细胞进行3%低氧处理,在不同时间点应用Western Blot、免疫荧光等方法观察其自噬情况。结果显示:和常氧对照组相比,经过3%低氧处理后神经干细胞的自噬水平显著增加。2.2抑制自噬阻碍神经干细胞的增殖为了进一步验证自噬对神经干细胞存活的影响,我们应用自噬抑制剂3-MA处理神经干细胞,不同时间点后对其进行CCK-8检测。结果显示:抑制自噬后无论是低氧还是常氧条件下神经干细胞的存活能力均降低,在低氧下降低尤其显著,这提示自噬对神经干细胞的增殖有显著影响。3.低氧条件下神经干细胞中Wip1的表达变化及其在细胞增殖中的作用Wip1作为与细胞增殖周期蛋白密切相关的磷酸酶,在细胞增殖过程中发挥着重要作用。为了探究低氧条件下Wip1对神经干细胞增殖的调节作用,我们进行了以下实验:3.1低氧条件下神经干细胞中Wip1的表达变化我们首先检测了不同氧浓度不同时间点神经干细胞中Wip1的表达情况。结果显示:在常氧条件下,Wip1在神经干细胞中有少量的基础性表达;在3%低氧处理后Wip1的表达量明显升高。我们进一步应用real-time PCR技术检测不同氧浓度不同时间点处理神经干细胞后Wip1的m RNA水平,发现低氧处理24 h和72 h,与常氧对照相比,低氧组的Wip1 m RNA无明显改变,低氧48 h其m RNA水平明显低于常氧组,这些数据提示Wip1的转录活性并没有贡献低氧下Wip1蛋白水平的增加。1.6自噬(线粒体自噬)抑制剂Mdivi-1对神经干细胞中ROS含量的影响3.2敲低Wip1后观察神经干细胞的存活情况为了进一步探究在低氧下Wip1对神经干细胞增殖的作用,我们应用si RNA技术敲低Wip1的表达,在低氧不同时间观察其对神经干细胞存活能力的影响。结果显示:用si RNA敲低Wip1表达,常氧和低氧下神经干细胞的存活能力都有所降低。3.3敲除Wip1后观察神经干细胞的存活情况进一步用Wip-/-小鼠来源的神经干细胞经低氧处理不同时间后同样发现低氧组与常氧组相比神经干细胞的存活率明显下降,且随时间增加更为显著,提示Wip1在低氧促神经干细胞增殖的过程中发挥着重要的调控作用。3.4敲低Wip1后对神经干细胞自噬活性的影响通过上述研究我们发现,自噬和Wip1都参与低氧下对神经干细胞增殖的调控,但是二者在调控神经干细胞增殖中的相互作用尚不清楚。为探明在低氧过程中Wip1与自噬的关系,我们先用Wip1 si RNA转染神经干细胞,然后以Western Blot检测si RNA干预Wip1后对神经干细胞自噬活性的影响。结果显示:应用Wip1 si RNA后低氧对神经干细胞自噬的激活作用受到抑制,常氧组未发现明显变化。综上所述,本研究证实了在低氧(3%)条件下神经干细胞的增殖能力增强,自噬水平随低氧时间增加而升高,同时发现在该低氧条件下神经干细胞中Wip1的表达水平升高,并初步阐明Wip1在调节神经干细胞增殖和促进自噬方面发挥重要作用。总之,本研究首次发现了低氧条件下在神经干细胞增殖过程中自噬和Wip1可能存在关联,这为探索低氧促进神经干细胞增殖的分子机制提供了新的思路。我们将在以后的研究中更深入地探讨自噬和Wip1在介导低氧促进神经干细胞增殖过程中的相互作用。脑卒中是一类严重危害人类健康的疾病,已经逐渐成为威胁人类生命的主要杀手。我国作为世界上人口最多的国家,随着人民生活水平的提高,我国的老年人数量在显著增加,与之而来的一些与年龄有关的疾病发病率也逐年增加,脑卒中作为其中的一种给患者本人及其家庭带来了的严重的负面影响。在脑卒中中其最主要类型是缺血性脑卒,缺血性脑卒中主要是由大脑动脉栓塞造成局部供血不足引起,可对脑组织造成严重损伤。由于缺血性脑卒中发病急促、治疗的时间窗短,危害严重,只有少数患者能够得到及时的治疗,因此进一步探究缺血性脑卒中的病理生理过程,为进一步的防治提供参考就显得尤为重要。自噬(autophagy)是一种细胞自身古老的自我保护机制,线粒体自噬作为其中的特殊类型,近年来成为研究的热点。线粒体自噬(mitophagy)是指在ROS(Reactive Oxygen Species,ROS)、营养缺乏、缺血/缺氧、细胞衰老等外界刺激的作用下,线粒体发生损伤或老化,受损线粒体被特异性识别包裹进自噬体中并进一步与溶酶体融合,从而将受损线粒体降解的过程,其概念由Lemasters等人在2005年首次提出,其最基本内容是:线粒体被自噬体包裹并运送至溶酶体进行分解代谢的过程。线粒体自噬活动受到多种分子蛋白的调节,而BNIP3作为其中的一种,其作用越来越受到关注。BNIP3(Bc1-2/adenovirus E1B 19 k D protein interacting protein 3)隶属于Bcl-2蛋白超家族,可与腺病毒转录基因E1B编码的E1B19k D蛋白或Bcl-2蛋白相互作用,在体内主要定位于线粒体外膜,BNIP3启动子区因含有结合HIF-1(HypoxiaInducible Factor 1,HIF-1)的低氧反应元件HRE,所以也是HIF-1的靶基因。在发生脑卒中时,机体发生缺血缺氧,此时HIF-1能够作用于BNIP3,使其表达水平上调。BNIP3的功能研究主要集中于两个方面:一方面BNIP3可以促进细胞凋亡或者坏死,起促进死亡的作用,另一方面BNIP3可以引起线粒体自噬,进而促进细胞存活。现在的研究热点越来越倾向于聚焦BNIP3的促存活作用。本研究采用大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型(permanent Middle Cerebral Artery Occlusion,p MCAO),在MCAO处理不同时间后,观察BNIP3、线粒体自噬相关蛋白的表达变化,分析脑缺血损伤程度与BNIP3表达水平之间的关系,探讨线粒体自噬和BNIP3在缺血性脑卒中发病过程中的可能作用。本研究发现在脑缺血早期线粒体自噬被激活,缺血晚期线粒体自噬被抑制而导致脑损伤加重,在此过程中BNIP3可能发挥重要的调控作用。主要研究结果如下:1.脑缺血不同时间点大鼠脑梗死体积的变化1.1大鼠脑组织TTC染色为进一步评价大鼠p MCAO后的脑损伤情况,我们对p MCAO不同时间点处理的大鼠脑组织进行切片,用TTC染色来确定脑损伤程度。发现0 h(sham)组大鼠无脑梗死发生,其余各组均存在脑梗死区,且随缺血时间(3 h、9 h、24 h)大鼠脑梗死体积逐渐增加,24 h组脑梗死体积到50%以上。2.线粒体形态在脑缺血过程中的改变2.1 p MCAO后不同时间点线粒体自噬自噬体的变化用透射电镜观察p MCAO后不同时间点的线粒体自噬自噬体的形态和结构,0 h(sham)大鼠脑组织中神经细胞的线粒体结构正常,缺血3 h和9 h线粒体多变圆,并可见典型的线粒体自噬情况,线粒体被溶酶体包裹,形成具有双层膜的自噬溶酶体结构;缺血24 h线粒体形态结构受到严重破坏:双层膜结构不完整,嵴消失,线粒体肿胀明显加剧,且多呈空泡化,完全观察不到线粒体自噬结构。3.BNIP3和线粒体自噬相关蛋白在脑缺血中的表达变化3.1 p MCAO后不同时间点BNIP3表达的动态变化为检测p MCAO后不同时间点BNIP3的变化情况,我们收集p MCAO后不同时间点的脑组织进行Western Blot实验。实验结果显示,当p MCAO处理3 h和9 h时BNIP3蛋白表达水平升高,而p MCAO处理24 h时BNIP3表达水平下调,这提示BNIP3在p MCAO后不同时间点有先升后降的特点,其可能在脑缺血早期发挥作用。3.2 p MCAO后不同时间点线粒体自噬相关蛋白的变化我们又进一步检测了p MCAO后不同时间点线粒体自噬相关蛋白的表达变化,结果显示,当p MCAO处理3 h和9 h时自噬上游调控分子Beclin-1表达增加,自噬标记分子LC3-II/I比值升高,接头蛋白P62和线粒体标记蛋白TOM20、HSP60水平下降,提示线粒体自噬被激活;但是,随着缺血时间的延长这些蛋白表达发生了明显改变,脑缺血24 h时Beclin-1表达下调,LC3-II/I比值降低,而P62和TOM20、HSP60水平增加。以上结果提示,在脑缺血早期线粒体自噬被激活,而在脑缺血晚期线粒体自噬受到抑制。综上所述,本研究发现在脑缺血过程中线粒体自噬以及BNIP3的表达变化与脑缺血损伤程度密切相关:线粒体自噬在脑缺血早期被激活,而在脑缺血晚期受到抑制;BNIP3高表达有利于减轻缺血性脑损伤,BNIP3低表达可能会加重其损伤程度。该结果为今后研究BNIP3的潜在的脑保护作用提供了直接证据,同时也为临床治疗缺血性脑损伤疾病提供了新的干预靶点。
【关键词】：神经干细胞 自噬 Wip1 低氧 线粒体自噬 脑缺血 BNIP3 p MCAO
【学位授予单位】：中国人民解放军军事医学科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R743.3
【目录】：

• 第一部分 低氧促神经干细胞增殖中自噬的调节作用6-49
• 缩写词表6-7
• 中文摘要7-11
• 英文摘要11-17
• 前言17-20
• 材料与方法20-30
• 一 实验材料和试剂20-23
• 二 实验方法23-30
• 实验结果30-42
• 1. 低氧对神经干细胞活性的影响30-35
• 1.1 神经干细胞的分离和培养30
• 1.2 神经干细胞的鉴定30-31
• 1.3 低氧对神经干细胞存活的影响31-32
• 1.4 低氧对神经干细胞增殖的影响32-33
• 1.5 低氧对神经干细胞中ROS含量的影响33-34
• 1.6 自噬（线粒体自噬）抑制剂Mdivi-1 对神经干细胞中ROS含量的影响34-35
• 2. 低氧对神经干细胞自噬的影响35-37
• 2.1 低氧条件下神经干细胞自噬水平的变化35-36
• 2.2 抑制自噬阻碍神经干细胞的增殖36-37
• 3. 低氧条件下神经干细胞中Wip1的表达变化及其在细胞增殖中的作用37-42
• 3.1 低氧条件下神经干细胞中Wip1的表达变化37-38
• 3.2 敲低Wip1后观察神经干细胞的存活情况38-40
• 3.3 敲除Wip1后观察神经干细胞的存活情况40-41
• 3.4 敲低Wip1后对神经干细胞自噬活性的影响41-42
• 讨论42-44
• 结论44-45
• 参考文献45-49
• 第二部分 线粒体自噬与BNIP3在脑缺血损伤中的作用研究49-69
• 缩写词表49-50
• 中文摘要50-53
• 英文摘要53-56
• 前言56-58
• 材料与方法58-62
• 1. 实验材料58-60
• 2. 实验方法60-62
• 实验结果62-65
• 1. 脑缺血不同时间点大鼠脑梗死体积的变化62
• 2. 线粒体形态在脑缺血过程中的改变62-63
• 2.1 p MCAO后不同时间点线粒体自噬自噬体的变化62-63
• 3. BNIP3和线粒体自噬相关蛋白在脑缺血中的表达变化63-65
• 3.1 p MCAO后不同时间点BNIP3表达的动态变化63-64
• 3.2 p MCAO后不同时间点线粒体自噬相关蛋白的变化64-65
• 讨论65-66
• 结论66-67
• 参考文献67-69
• 附录I：论文发表情况69-70
• 附录II：发表论文全文70-78
• 个人简历78-79
• 致谢79

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 ;应激适应比低氧适应在更大程度上增强动物对亚致命性低氧的抵抗[J];高原医学杂志;1995年01期

2 赵诚民;低氧仪及其研制开发的意义[J];体育科学;2000年02期

3 吕国蔚;低氧反应通路[J];生理科学进展;2001年01期

4 于天正,马传桃;低氧对培养的不同内径的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响[J];中国应用生理学杂志;2001年01期

5 吕国蔚;低氧耐受动物细胞的耐低氧策略[J];高原医学杂志;2001年01期

6 钱频,王关嵩,蒙伟宗,关崧,陈维中;低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞表达信号转导及转录激活因子基因表达的影响[J];第三军医大学学报;2003年02期

7 陈宝元;慢性阻塞性肺疾病夜间低氧研究的进展[J];国外医学(呼吸系统分册);2003年01期

8 周兆年;低氧与健康研究[J];中国基础科学;2003年05期

9 陈伟,陈家佩,葛世丽,从玉文,付小兵;低氧对大鼠肝肾组织内红细胞生成素和低氧诱导因子-1α基因表达的影响[J];中国危重病急救医学;2004年01期

10 王映梅,李青,闫庆国,惠延平,马福成,胡沛臻;低氧对家兔心脏成纤维细胞增殖与表型的影响[J];心脏杂志;2004年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 秦岭;文赛兰;井然;宋智;李岑;向阳;;间歇性低氧对小鼠瘦素及其受体表达的影响[A];湖南省生理科学会2006年度学术年会论文摘要汇编[C];2007年

2 陈学群;杜继曾;;低氧脑-内分泌网络作用[A];中国生理学会第23届全国会员代表大会暨生理学学术大会论文摘要文集[C];2010年

3 郭世荣;李式军;李娟;解卫华;;根际低氧逆境的危害和蔬菜作物的耐低氧性研究进展[A];中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文集[C];2000年

4 景孝堂;范文红;吴燕;杨应忠;范明;;神经发育中低氧相关新基因的筛选[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

5 杜继曾;陈学群;张颖沙;刘健翔;许宁一;张家兴;;低氧下生长发育抑制与认知功能促进的调节机制[A];中国生理学会第五届比较生理学学术会议论文汇编[C];2004年

6 单淑香;;慢性阻塞性肺疾病患者睡眠低氧的初步研究[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

7 马子敏;范明;;低氧损伤与离子通道[A];2003’离子通道、受体与信号转导专题研讨会专辑[C];2003年

8 李海生;陈金武;朱玲玲;赵彤;赵惠卿;马兰;丁爱石;范明;;不同程度持续低氧对人骨髓间充质干细胞增殖的作用[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

9 彭兆云;孙学军;练庆林;蒋春雷;;高压氧预处理提高小鼠耐低氧能力的实验研究[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

10 洪欣;尹昭云;谢印芝;吕永达;;低氧时肺动脉内皮细胞功能变化及其在肺水肿发生中的作用[A];中国生理学会第六届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2003年

中国重要报纸全文数据库 前8条

1 本报记者 周仲全;窒息的海洋[N];辽宁日报;2008年

2 ;低氧健身好处多[N];中国中医药报;2003年

3 王雪飞;间歇性低氧对学习记忆有利[N];健康报;2004年

4 李庆;健身新概念：低氧运动[N];工人日报;2000年

5 记者 马芳;地下鼠低氧生存源自基因突变[N];南方日报;2014年

6 北京体育大学科研中心教授 胡扬;低氧运动也很棒[N];健康报;2010年

7 健康时报记者 叶依;睡几天“低氧屋”也能减肥？[N];健康时报;2008年

8 记者 严存义 周丹波;高原低氧关注健康[N];甘肃日报;2003年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 刘超;涎腺腺样囊性癌中低氧与自噬相关基因的生物信息学研究[D];山东大学;2015年

2 纪志鹏;低氧预处理诱导的HIF-1α可促进缺血再灌注损伤肝脏糖代谢并保护线粒体的研究[D];山东大学;2015年

3 叶巧;Tat-NGB低氧神经保护作用机理研究及低氧相关模型探索与应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2016年

4 张森;低氧右心室在压力/容量超负荷条件下的适应机制研究[D];北京协和医学院;2016年

5 周洋;miR-199a-5p在慢性缺氧心肌内质网应激中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2016年

6 许晓玲;抑制CapG基因预防低氧性肺动脉高压的研究[D];浙江大学;2016年

7 李海生;低氧促进人骨髓间充质干细胞增殖和分化及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

8 黄群华;血小板源生长因子及其受体在低氧性肺血管平滑肌细胞增殖中的调节作用及其分子机制探讨[D];中国协和医科大学;1999年

9 张家兴;模拟高原间歇性低氧对小鼠学习记忆功能的影响[D];浙江大学;2005年

10 孙希武;不同程度减压低氧对心功能的影响及其机制探讨[D];中国协和医科大学;1995年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 周姗姗;低氧预处理的骨髓间充质干细胞对慢性肾衰竭大鼠肾脏的修复作用[D];福建医科大学;2015年

2 严卫亚;低氧预处理MSCs通过Pim-1高表达抑制细胞凋亡的实验研究[D];苏州大学;2015年

3 王慧娟;低氧对团头鲂生理生化指标及低氧应答基因表达的影响[D];华中农业大学;2015年

4 吴鑫杰;低氧对团头鲂细胞凋亡及抗氧化酶活性的影响[D];华中农业大学;2015年

5 寇蓬;Twist在低氧微环境中宫颈癌顺铂耐药的作用及机制研究[D];昆明医科大学;2015年

6 李锦松;金丝桃苷对低氧时大鼠认知功能损伤的改善作用及其抗氧化应激损伤机制[D];广东药学院;2015年

7 郭佳;宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响[D];复旦大学;2014年

8 张振中;低氧处理对不同年龄段C57小鼠骨髓间充质干细胞增殖能力的影响[D];南方医科大学;2015年

9 张建明;低氧下cyclinB1表达与肝癌细胞对Hsp90抑制剂17-DMAG耐药性的关系探讨[D];南方医科大学;2015年

10 吴国瑞;低氧微环境对脑星形胶质细胞凋亡及对BCL-2表达的影响[D];昆明医科大学;2015年

，

本文编号：1045867