大鼠缺氧预处理与缺血性脑损伤后外周及中枢免疫细胞的变化研究

发布时间：2017-11-11 10:08

  本文关键词：大鼠缺氧预处理与缺血性脑损伤后外周及中枢免疫细胞的变化研究

  更多相关文章： 外周免疫细胞 中枢免疫细胞 缺氧预处理 大脑中动脉闭塞

【摘要】：目的:检测外周免疫细胞(T细胞、NK细胞)在缺氧预处理与缺血性脑损伤后外周血中的变化;检测中枢免疫细胞(小胶质细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞)在缺氧预处理与缺血性脑损伤后大脑皮质中表面标记物的表达量变化以及细胞数目、形态变化;探讨免疫系统在缺氧预处理与缺血性脑损伤中的变化及可能的作用机制。方法:将70只SPF级健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠按随机分组法分成5组:正常对照组(N,12只)、假手术组(S,15只)、缺氧预处理组(HP,13只)、脑梗死组(M,15只)、缺氧预处理+脑梗死组(HM,15只)。MCAO术后24h用Longa5分评分法对大鼠神经功能进行评分;用imageJ软件分析测量大鼠脑梗死面积;流式细胞仪检测外周动脉血中T细胞(CD4+、CD8+百分率)和NK细胞;实时定量聚合酶链反应检测梗死侧大脑皮质中Iba1、CNP-ase、GFAP mRNA表达水平;免疫组化观察大鼠正常脑组织与梗死脑组织小胶质细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞的数目与形态学变化。结果:与M组比较,HM组大鼠神经功能缺损症状较轻,神经功能评分较低(p0.05),脑梗死面积减小(p0.05);流式细胞仪检测各组T细胞(CD4+、CD8+百分率)、NK细胞(CD161+百分率)无差异(p0.05);各组PCR结果显示:与N组比较,HP组大鼠Iba1基因表达量降低(p0.05),与M组比较,HM组大鼠Iba1基因表达量降低(p0.05);与N组比较,HP组大鼠CNP-ase基因表达量降低(p0.05);GFAP基因在各组无明显变化(p0.05);各组免疫组化结果显示:N组小胶质细胞呈高度分支状,HP组细胞形态及数目无明显变化(p0.05);M组小胶质细胞活化,突起数目减少或消失,细胞形态呈圆形或阿米巴状,缺血边缘区小胶质细胞数目增多(p0.05);HM组小胶质细胞突起数目减少无M组明显,细胞多为分支状,缺血边缘区小胶质细胞数目低于M组(p0.05);与N组比较,HP组星形胶质细胞突起增粗,数目无明显变化(p0.05);与N组比较,M组星形胶质细胞数目增多(p0.05);M组和HM组星形胶质细胞发生活化,细胞胞体增大,突起增长增粗,缺血边缘区星形胶质细胞数目增多,M组与HM组星形胶质细胞数目无明显差异性变化(p0.05);与N组比较,HP组少突胶质细胞数目减少(p0.05),少突胶质细胞在M组和HM组形态发生了变化,表现为突起增多、增粗,但这两组间少突胶质细胞数目未见明显差异性变化(p0.05)。结论:1.缺氧预处理能够减轻缺血性脑损伤后神经功能缺损症状、减小脑梗死的面积,发挥脑保护作用;2.在脑梗死24h,梗死中心区神经元数量明显减少,小胶质细胞、星形胶质细胞及少突胶质细胞数量也减少,并且胶质细胞形态发生变化,提示梗死一旦发生,会很快对脑细胞产生影响。3.缺氧预处理后,脑梗死大鼠小胶质细胞表达降低,活化状态的细胞减少,提示缺氧预处理可能通过抑制小胶质细胞的进一步活化,从而抑制其神经毒性,发挥神经保护作用;少突胶质细胞和星形胶质细胞可能也参与了缺氧预处理脑保护作用。4.大鼠脑梗死24h后,外周血液中T淋巴细胞(CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)和NK细胞(CD161+)百分率未见明显升高,提示外周免疫细胞可能在卒中后不同时期变化不一致,免疫细胞功能的抑制或降低可能参与了脑卒中诱导的免疫抑制综合征。
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R743.3

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 杨兴旺;张辉;丁智斌;张海飞;尉杰忠;李艳花;王青;冯前进;肖保国;马存根;;小胶质细胞TLR4/NF-κB通路在脑血管疾病中的作用研究近况[J];中国免疫学杂志;2015年01期

2 林真珍;邵蓓;金坤林;王柳清;蒋慧刚;肖丽;张红霞;;流式细胞技术分析大鼠缺血性脑卒中后脑组织内T细胞的变化[J];中国临床神经科学;2013年02期

3 徐米清;殷英;孙卫文;张亚杰;洪明;;慢性肾衰竭大鼠小胶质细胞数量及形态变化[J];实用医学杂志;2013年04期

4 沈维高;何欣;王振江;;星形胶质细胞的生物学功能及其与疾病的关系研究进展[J];北华大学学报(自然科学版);2008年06期

5 马文领,马常升,戴维国,葛莉,杨天祝;脑缺血早期星形胶质细胞胶质原纤维性酸性蛋白免疫组化的时程变化研究[J];解剖学杂志;2001年01期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 李昕华;缺血预处理星形胶质细胞神经保护作用机制研究[D];吉林大学;2008年

，

本文编号：1170920