Ad.RGD-ING4-PTEN对神经胶质瘤U87细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

发布时间：2017-11-20 19:15

  本文关键词：Ad.RGD-ING4-PTEN对神经胶质瘤U87细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

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【摘要】：目的:探讨经RGD修饰的生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因与第10染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)双基因共表达的腺病毒载体(Ad.RGD-ING4-PTEN)体外对神经胶质瘤U87细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响。方法:以Ad.RGD-ING4-PTEN为实验组,Ad.RGD-ING4/-PTEN为单基因对照组,PBS、Ad.RGD/Ad-GFP为空白对照组,分别体外感染U87神经胶质瘤细胞。Western blotting检测目的基因ING4和PTEN在U87细胞中的表达,MTT法检测实验组病毒感染对U87细胞增殖的影响,流式细胞术及Real-time PCR法检测神经胶质瘤细胞凋亡及凋亡相关基因(Bcl-2、Bax、caspase-3、HIF-1α)表达变化,划痕实验及Transwell实验检测实验组病毒感染对U87细胞迁移及侵袭能力的影响,Real-time PCR法检测侵袭相关基因(MMP-2、MMP-9)表达变化。结果:成功检测到ING4和PTEN仅在实验组及相应单基因对照组中表达。实验组第5天细胞抑制率可达(83.1±4.6)%、凋亡率可达(40.7±4.3)%,与单基因组及空白对照组相比差异均有统计学意义(P0.05);实验组能明显上调U87细胞中Bax、caspase-3和下调HIF-1α、Bcl-2等细胞凋亡相关蛋白的表达(均P0.05),而且肿瘤侵袭相关分子MMP-2、MMP-9的表达也明显下调(均P0.05);实验组细胞迁移距离[(70.1±6.2)μm]和穿膜细胞数[(26.6±3.5)个]均明显减少,与单基因组及空白对照组比较差异有统计学意义(均P0.05)。结论:与单基因腺病毒相比,Ad.RGD-ING4-PTEN双基因具有更显著的抑制U87神经胶质瘤细胞增殖、诱导其凋亡,并抑制其迁移及侵袭能力。
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心血液肿瘤科;苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81001016)~~
【分类号】：R739.41
【正文快照】： 神经胶质瘤是人类发病率最高的原发性中枢神经系统恶性肿瘤,约占颅脑肿瘤的46%[1];中位生存时间约为1年,5年生存率不足5%[2]。该病确切的发病机制尚不清楚,其发展过程是多步骤多因素所致[3]。现阶段主要治疗手段是手术治疗,术后辅以放疗和化疗,但总体疗效不理想。近年来,随着

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本文编号：1208218