大鼠脑缺血后miRNA-124的表达及与Caspase-3关系的初步研究

发布时间：2017-11-24 03:25

  本文关键词：大鼠脑缺血后miRNA-124的表达及与Caspase-3关系的初步研究

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【摘要】：目的：本课题采用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)闭塞建立脑缺血损伤模型,研究大鼠脑缺血后miRNA-124在脑组织和血液中表达的变化,以及脑组织中miRNA-124与凋亡蛋白Caspsae-3的关系,为探讨血液中的miRNA-124是否有可能成为早期诊断脑缺血的生物标记物以及脑组织中的miRNA-124与凋亡因子Caspase-3是否存在相关性提供依据。方法：40只成年健康雄性大鼠随机分为假手术组(n=8)、脑缺血3小时组(n=8)、脑缺血6小时组(n=8)、脑缺血12小时组(n=8)、脑缺血24小时组(n=8)。脑缺血组采用线栓法建立MCAO模型,假手术组完成所有手术过程,但插入线栓后立即拔出。采用Zea Longa评分判断模型制备是否成功,采用mNSS评分评价神经功能,取全脑行TTC染色观察缺血后脑组织的形态学变化和确定脑缺血的位置。采用实时荧光定量PCR检测脑组织及血液中miRNA-124的表达,采用Western Blot检测脑组织中Caspase-3的表达。采用统计学方法进行数据分析。结果：成功建立15例模型,各组3例。mNSS评分显示：各脑缺血组的mNSS评分均高于假手术组,差异有统计学意义；脑缺血6小时组的mNSS评分高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组的mNSS评分高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组的mNSS评分高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义；随着脑缺血时间的延长,·mNSS评分逐渐增高,差异有统计学意义。TTC染色显示：假手术组未见梗死灶出现,脑缺血组出现明显梗死灶。脑组织中miRNA-124的表达情况：假手术组与各脑缺血组miRNA-124均有表达；脑缺血3小时组miRNA-124的表达量高于假手术组,差异无统计学意义；脑缺血6、12、24小时组miRNA-124的表达量均高于假手术组,差异有统计学意义；脑缺血6小时组miRNA-124的表达量高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组miRNA-124的表达量高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组miRNA-124的表达量高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义；miRNA-124在脑缺血后6、12、24小时均出现上调,且呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义。血液中miRNA-124的表达情况：假手术组与各脑缺血组miRNA-124均有表达；脑缺血3、6、12、24小时组miRNA-124的表达量均高于假手术组,差异有统计学意义；脑缺血6小时组miRNA-124的表达量高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组miRNA-124的表达量高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组miRNA-124的表达量高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义；miRNA-124在脑缺血后3、6、12、24小时均出现上调,且呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义。脑组织中Caspase-3的表达情况：假手术组与各脑缺血组Caspase-3均有表达。脑缺血12小时组Caspase-3的表达量高于假手术组,差异无统计学意义；脑缺血3、6、24小时组Caspase-3的表达量均高于假手术组,差异有统计学意义；脑缺血6小时组Caspase-3的表达量高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组Caspase-3的表达量高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组Caspase-3的表达量高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义；Caspase-3在脑缺血后3、6、12、24小时均出现上调,且呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义。脑组织中：miRNA-124的表达量与脑组织中Caspase-3的表达量呈显著正相关,差异有统计学意义。结论：1.大鼠脑缺血后脑组织及血液中miRNA-124的表达均上调；2.大鼠脑缺血后脑组织中Caspase-3的表达上调；3.血液中的miRNA-124可成为早期诊断缺血性脑血管病的生物标记物；4.脑组织中的miRNA-124与Caspase-3呈显著正相关,Caspase-3可能受miRNA-124的调控,可通过干预miRNA-124来抑制神经元的凋亡,进而有效地防治缺血性脑损伤。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.3

【参考文献】

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本文编号：1220869