神经内分泌瘤BON-1及H727细胞的体外培养模型构建及药物作用研究

发布时间：2017-12-04 20:37

  本文关键词：神经内分泌瘤BON-1及H727细胞的体外培养模型构建及药物作用研究

  更多相关文章： 神经内分泌瘤 三维培养 舒尼替尼 阿西替尼

【摘要】：目的：通过不同材料的制备,建立神经内分泌瘤细胞的体外三维培养模型,为神经内分泌瘤的药物筛查提供新的方法；探究VEGFR抑制剂对人神经内分泌瘤BON-1和H727细胞系的影响；同时观察舒尼替尼与阿西替尼对二维培养与三维培养下的BON-1以及H727细胞的影响,并探讨其影响机制。方法：(1)制备琼脂糖、海藻酸锶—聚丙烯酰胺以及聚乙二醇交联甲基乙烯基醚马来酸酐水凝胶,显微镜下观察BON-1细胞及H727细胞在水凝胶中的培养情况。(2)96孔板分别培养神经内分泌瘤BON-1和H727细胞,并分别加入终浓度为Oumol/L(阴性对照组)、1 umol/L、2 umol/L的舒尼替尼以及1 umol/L、2 umol/L的阿西替尼作用于细胞后,不同时间段CCK-8法测定各组细胞增殖的情况。(3)体外建立BON-1和H727细胞的二维及三维培养模型：①CCK-8法检测舒尼替尼及阿西替尼对不同培养方式下的BON-1细胞抑制率的影响；②CCK-8法检测舒尼替尼及阿西替尼对不同培养方式下的H727细胞抑制率的影响；③FDA/PI双染法检测舒尼替尼对H727细胞多细胞球体的影响；④数码显微分析系统评价阿西替尼对H727细胞多细胞球体的影响。结果：(1)BON-1和H727细胞在海藻酸锶/聚丙烯酰胺水凝胶上培养可形成类似琼脂糖培养结果,而在聚乙二醇交联甲基乙烯基醚马来酸酐水凝胶中,两者均能形成多细胞球体。(2)CCK-8法检测结果显示：各实验组所测OD值低于对照组,进行组间比较,差异存在统计学意义,P0.05,即阿西替尼及舒尼替尼给药组,BON-1及H727细胞增殖速度低于阴性对照组。(3)①随着浓度的升高,舒尼替尼以及阿西替尼对BON-1细胞的抑制率逐渐增大,二维平面培养的抑制率显著高于三维培养,P0.05,该差异具有统计学意义；②二维培养下,H727细胞的抑制率随着舒尼替尼及阿西替尼的浓度的增加逐渐增大;③FDA/PI双染法检测结果示：当舒尼替尼浓度≥4uM时,给药48h后球体裂解,形态消失,大量H727细胞出现凋亡；④随着时间推移,高剂量阿西替尼组的H727细胞多细胞球体在体积上明显缩小,差异具有统计学意义。结论：琼脂糖、海藻酸锶-聚丙烯酰胺水凝胶及聚乙二醇交联甲基乙烯基醚马来酸酐水凝胶可用于神经内分泌瘤BON-1及H727细胞的体外三维模型构建,其中琼脂糖涂层培养具有更良好的可控性；舒尼替尼、阿西替尼对神经内分泌瘤细胞BON-1细胞和H727细胞的生长增殖具有抑制作用；三维培养下的BON-1细胞对舒尼替尼、阿西替尼的敏感性低于二维培养；舒尼替尼、阿西替尼能够促进H727细胞凋亡。
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.4

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 方正;韦萍;杨照;;舒尼替尼合成路线图解[J];中国医药工业杂志;2007年11期

2 陈逢生;石敏;罗荣城;;多靶点酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼的研究进展[J];临床肿瘤学杂志;2008年03期

3 缪景霞;宋双;粟东云;张兰英;;舒尼替尼引起全身大面积淤斑1例[J];护理研究;2009年32期

4 王尔兵;王肇炎;;多靶点酪氨酸激酶抑制剂舒尼替尼临床评价[J];世界临床药物;2007年05期

5 刘彪;林蓉;廖健宇;李子成;陈珂磊;;舒尼替尼的合成[J];中国医药工业杂志;2007年08期

6 杨梅;汤致强;;苹果酸舒尼替尼胶囊[J];中国新药杂志;2009年04期

7 吴小艳;;贝伐单抗和舒尼替尼可导致颌骨坏死[J];药物不良反应杂志;2011年01期

8 季建美;徐小红;;舒尼替尼治疗晚期肺癌肺空洞形成1例[J];临床肺科杂志;2012年03期

9 冯艳红;;舒尼替尼对转移性肾肿瘤的安全性及护理观察[J];中国现代药物应用;2012年05期

10 张文婷;桂玲;贡雪們;刘东;;苹果酸舒尼替尼致不良反应30例调查分析[J];中国医院药学杂志;2013年05期

中国重要会议论文全文数据库 前5条

1 陈贵平;李方印;王华;王宗平;邱彭年;刘卓;宋正波;;舒尼替尼治疗晚期转移性肾癌22例报告[A];2012浙江省医学会男科学、泌尿外科学术年会论文汇编[C];2012年

2 吴晶;张楠;董鹏;;舒尼替尼一线治疗中国转移性肾细胞癌患者的药物经济学评价[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年

3 胡骁轶;王国民;郭剑明;林宗明;孙立安;许明;徐志兵;王杭;戎瑞明;仓晨;;舒尼替尼治疗晚期肾癌中血液学不良反应的诊治体会[A];华东六省一市泌尿外科学术年会暨2011年浙江省泌尿外科、男科学学术年会论文汇编[C];2011年

4 于楠;吴翔;李学松;高莹;何志嵩;郭晓蕙;;29例应用舒尼替尼治疗肾细胞癌患者的甲状腺功能观察及分析[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年

5 胡R，

本文编号：1252279