盐酸小檗碱诱导人脑胶质瘤细胞U251凋亡及其与HERG钾离子通道的表达相关研究
本文选题:盐酸小檗碱 切入点:胶质瘤 出处:《临床神经外科杂志》2014年02期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的探讨盐酸小檗碱(ber)诱导人脑胶质瘤细胞U251凋亡及其与HERG钾离子通道表达相关性。方法使用不同浓度的ber处理人胶质瘤细胞U251,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法测定细胞增值率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞术测定细胞凋亡率,分别采用实时荧光定量PCR与Western Blotting检测HERG钾通道的RNA及蛋白的表达情况。结果 MTT法检测显示细胞抑制率呈浓度与时间依赖性,且随药物浓度增加而增大(P0.05),其24 h的半数抑制浓度(IC50))是(8.78±0.20)μmol/l;Hoechst33258荧光染色法检测表明处理组出现典型的凋亡特征;且流式细胞术检测结果表明随着ber的剂量增加U251细胞的早期凋亡率及晚期凋亡率逐渐增大(P0.05);RT-PCR与Western Bloting检测结果显示ber处理后U251细胞的HERG钾通道的RNA含量及蛋白的表达均上调,且随着药物浓度的增高而增高。结论在体外ber可诱导人胶质瘤细胞系U251的凋亡,并可能通过上调HERG蛋白的表达抑制U251增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the apoptosis of human glioma cell U251 induced by berberine hydrochloride (berberine hydrochloride) and its correlation with HERG potassium channel expression. Methods U251 human glioma cell line U251 was treated with different concentrations of ber. The changes of cell morphology were observed by Hoechst33258 fluorescence staining. Apoptosis rate was measured by flow cytometry, RNA and protein expression of HERG potassium channel were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western Blotting, respectively. Results MTT assay showed that the cell inhibition rate was in a concentration and time dependent manner. The half inhibitory concentration (IC50) at 24 h was 8.78 卤0.20 渭 mol / L Hoechst33258 fluorescence staining. The results of flow cytometry showed that the early apoptosis rate and late apoptosis rate of U251 cells increased gradually with the increase of ber dose. The results of RT-PCR and Western Bloting showed that the RNA content and protein expression of HERG potassium channel in U251 cells treated with ber were up-regulated. Conclusion ber can induce the apoptosis of human glioma cell line U251 in vitro and inhibit the proliferation of U251 by upregulating the expression of HERG protein.
【作者单位】: 苏州大学附属第三医院神经外科;
【分类号】:R739.4
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