氧化应激对帕金森病模型大鼠黑质自噬相关蛋白表达的影响
发布时间：2018-03-18 12:48
本文选题：帕金森病 切入点：黑质 出处：《华北理工大学》2017年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型大鼠进行侧脑室注射抗氧化剂、氧化应激诱导剂,观察大鼠行为学变化、检测氧化应激相关指标的含量变化及自噬相关蛋白的表达,探讨氧化应激对帕金森病模型大鼠黑质自噬相关蛋白表达的影响,为帕金森病的发病机制及治疗提供理论依据。方法144只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、帕金森病模型组(PD组)、抗氧化剂NAC组(NAC组)和氧化应激诱导剂Aβ组(Aβ组),采用颈背部皮下注射鱼藤酮制作PD模型,待模型制备成功后,sham组和PD组大鼠进行侧脑室注射生理盐水5μL,NAC组大鼠进行侧脑室注射N-乙酰半胱氨酰(N-acetylcysteine,NAC)5μL,Aβ组大鼠进行侧脑室注射β淀粉样蛋白(Beta amyloid protein,Aβ)5μL,分别在实验后4 d和8 d选取18只大鼠,用微量酶标法检测大鼠黑质GSH、GSH-Px、SOD和MDA的含量的变化;采用免疫组化法和免疫印迹法检测大鼠黑质自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达水平。所得实验数据用Excel建库后用SPSS(23.0)软件包对所得数据进行统计分析,所得数据均以均数±标准差(xˉ±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),以P0.05认为有统计学意义。结果1 sham组大鼠悬挂时间较长,评分值较高;与sham组相比,PD组大鼠评分值降低(P0.01),8 d组低于4 d组(P0.05);与PD组相比,NAC组大鼠评分值升高(P0.01),8 d组高于4 d组(P0.05);与PD组相比,Aβ组大鼠评分值降低(P0.01),8 d组低于4 d组(P0.05)。2 1)sham组大鼠黑质中GSH、GSH-Px、SOD的含量表达较高;与sham组相比,PD组大鼠黑质中GSH、GSH-Px、SOD含量降低(P0.05),8 d组低于4 d组(P0.05);与PD组相比,抗氧化剂NAC组大鼠黑质中GSH、GSH-Px、SOD含量增高(P0.05),8 d组高于4 d组(P0.05);与PD组相比,氧化应激诱导剂Aβ组大鼠黑质中GSH、GSH-Px、SOD含量降低(P0.05),8 d组低于4 d组(P0.05)。2)sham组大鼠黑质中MDA的含量表达较低;与sham组相比,PD组大鼠黑质中MDA含量增多(P0.05),8 d组高于4 d组(P0.05);与PD组相比,抗氧化剂NAC组大鼠黑质中MDA含量降低(P0.05),8 d组低于4d组(P0.05);与PD组相比,氧化应激诱导剂Aβ组大鼠黑质中MDA含量增高(P0.05),8 d组高于4 d组(P0.05)。3 sham组大鼠黑质中表达少量Beclin1、LC3阳性细胞;与sham组相比,PD组大鼠黑质中Beclin1、LC3蛋白表达和LC3II/LC3-I比值增多(P0.05),8 d组高于4d组(P0.05);与PD组相比,抗氧化剂NAC组大鼠黑质中Beclin1、LC3蛋白表达和LC3II/LC3-I比值降低(P0.05),8 d组低于4 d组(P0.05);与PD组相比,氧化应激诱导剂Aβ组大鼠黑质中Beclin1、LC3蛋白表达和LC3II/LC3-I比值增多(P0.05),8 d组高于4 d组(P0.05)。结论1氧化应激参与了帕金森病的发病、发展过程。2自噬参与了帕金森病的发病、发展过程。抗氧化剂NAC能够抑制自噬相关蛋白的表达,氧化应激诱导剂Aβ可上调自噬相关蛋白的表达。3氧化应激对帕金森病模型大鼠黑质自噬相关蛋白的表达具有促进作用,抗氧化应激可抑制帕金森病模型大鼠黑质自噬相关蛋白的表达,具有神经保护作用。
[Abstract]:The purpose of Parkinson's disease (Parkinson 's disease, PD) in a rat model of intraventricular injection of antioxidants, oxidative stress induced behavioral changes of the rats were observed, the expression of oxidative stress related indexes and the content change of autophagy related proteins, to investigate the impact of oxidative stress on the expression of autophagy related protein in substantia nigra of rats with Parkinson disease model and provide a theoretical basis for the pathogenesis of Parkinson's disease and treatment. Methods 144 clean grade healthy male SD rats were randomly divided into sham operation group (Group sham), Parkinson disease model group (PD group), NAC group (group NAC) antioxidants and oxidative stress inducer group A beta (A beta group), the PD model is established by subcutaneous injection of rotenone, after the model was successfully established, sham group and PD group rats were ICV injection of saline 5 L NAC rats were ICV injection of N- acetyl cysteinyl (N-acetylcysteine, NAC) 5 L, A beta 缁勫ぇ榧犺繘琛屼晶鑴戝娉ㄥ皠尾娣，
本文编号：1629645
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